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龙图腾网获悉成都第一制药有限公司申请的专利一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法和培养基获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116694550B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310852622.6，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法和培养基是由覃顺旺;熊城;石鑫;罗斌;杨瑞;刘昭华设计研发完成，并于2023-07-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法和培养基在说明书摘要公布了：本发明提供了一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法，包括以下步骤：S1、山莨菪愈伤组织的获得；S2、愈伤组织的增殖培养；S3、初代山莨菪细胞悬浮培养；S4、继代培养山莨菪细胞增殖培养。本发明还提供了山莨菪细胞，由所述的快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法制备得到。本发明以生物工程的细胞悬浮培养技术，采用山莨菪植物的胚轴为外植体诱导产生的愈伤组织细胞进行悬浮培养，并建立了山莨菪细胞的悬浮培养体系，很好地解决了当前山莨菪植物资源短缺的问题。该方法可实现大规模快速生产山莨菪植物有效成分含量高的培养物，以满足当前市场对山莨菪药材的大量需求。

本发明授权一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法和培养基在权利要求书中公布了：1.一种快速增殖山莨菪细胞生物量的培养方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、山莨菪愈伤组织的获得：采用消毒后的山莨菪种子接入MS培养基萌发，得到无菌幼苗，取所述无菌幼苗的胚轴接种至山莨菪愈伤组织诱导培养基，经过诱导培养得到所述山莨菪愈伤组织； S2、愈伤组织的增殖培养：选取步骤S1中得到所述山莨菪愈伤组织中浅黄色部分接种至山莨菪愈伤组织增殖培养基，经过培养后得到增殖后的愈伤组织； S3、初代山莨菪细胞悬浮培养：选取步骤S2中得到的所述增殖后的愈伤组织中浅黄色部分接种至初代山莨菪细胞液体培养基，培养后得到初代山莨菪细胞； S4、继代培养山莨菪细胞增殖培养：取培养了24～28天后的步骤S3所述的初代山莨菪细胞接种至继代山莨菪细胞增殖培养液体培养基，培养后得到山莨菪细胞； 步骤S1所述的山莨菪愈伤组织诱导培养基是以改良MS培养基为基础培养基，在所述改良MS培养基中每升含以下成份： 萘乙酸0.4～0.8mg、6-苄氨基腺嘌呤0.5～1.5mg、2,4-二氯苯氧乙酸1～2mg、玉米素0.1～0.3mg、L-半胱氨酸20～40mg、蔗糖20～40g；且MS培养基中不含硝酸铵，硝酸钾的浓度为2850mgL； 步骤S2中所述的山莨菪愈伤组织增殖培养基是以MS培养基为基础培养基，在所述MS培养基中每升含以下成份： 萘乙酸0.6～1.0mg、6-苄氨基腺嘌呤0.1～0.3mg、2,4-二氯苯氧乙酸1～3mg、精氨酸2～4mg、鸟氨酸2～4mg、蔗糖25～45g； 步骤S3中所述的初代山莨菪细胞液体培养基是以改良MS培养基为基础培养基，在所述改良MS培养基中每升含以下成份： 6-苄氨基腺嘌呤0.1～0.2mg、2,4-二氯苯氧乙酸1.5～2.5mg、激动素0.1～0.3mg、酵母多糖40～80mg、谷氨酰胺60～100mg、蔗糖15～35g； 所述改良MS培养基中叶酸浓度为1mgL、维生素B6的浓度为10mgL、维生素B1的浓度为1mgL； 步骤S4中所述的继代山莨菪细胞增殖液体培养基是以改良MS培养基为基础培养基，在所述改良MS培养基中每升含以下成份： 6-苄氨基腺嘌呤0.3～0.5mg、2,4-二氯苯氧乙酸1.0～3mg、激动素0.1～0.3mg、酵母多糖100～200mg、苯丙氨酸60～80mg、蔗糖20～40g； 所述改良MS培养基是指MS培养基中的KI浓度为0.75mgL，H3BO3的浓度为3mgL、MnSO4·H2O的浓度为10mgL； 其中，步骤S1中所述诱导培养的条件为：在20～28℃下避光培养；步骤S2中所述增殖培养的条件为：在25～29℃下避光培养；步骤S3中接种量为20～40gL，所述培养的条件为选择回旋震荡摇床、转速90～130rmin，在温度22～28℃下避光培养；步骤S4中，接种量为35～55gL，所述培养的条件为选择回旋震荡摇床、转速100～140rmin，在温度24～28℃下每天光照8～12小时，光照强度为800～1200lx。

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