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广东石油化工学院李桂银获国家专利权

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龙图腾网获悉广东石油化工学院申请的专利一种基于荧光共振能量转移构建用于GP73检测的荧光/电化学生物传感器获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116559137B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310746356.9,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种基于荧光共振能量转移构建用于GP73检测的荧光/电化学生物传感器是由李桂银;陈伟;闫睿洁;谭晓红设计研发完成,并于2023-06-25向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于荧光共振能量转移构建用于GP73检测的荧光/电化学生物传感器在说明书摘要公布了:一种基于荧光共振能量转移构建用于GP73检测的荧光电化学生物传感器,采用氮掺杂石墨烯量子点修饰GP73适配体为荧光共振供体和二硫化钼@二茂铁@钯纳米粒子为荧光共振受体,利用N‑GQDs‑GP73Apt和MoS2@Fc@PdNPs间的荧光共振能量转移现象,构建N‑GQDs‑GP73AptMoS2@Fc@PdNPs荧光电化学生物传感器,根据加入GP73蛋白前后的荧光强度恢复值以及电化学信号的电流变化值与GP73的关系,从而实现荧光电化学双模式检测GP73含量。该方法通过一步式反应获得两种信号检测模式,检测过程精简,快速灵敏、选择性好,实用性强。

本发明授权一种基于荧光共振能量转移构建用于GP73检测的荧光/电化学生物传感器在权利要求书中公布了:1.一种非诊断目的基于荧光共振能量转移构建用于高尔基体蛋白GP73检测的荧光电化学生物传感器的检测方法,按以下步骤进行: 步骤1:荧光共振供体N-GQDs-GP73Apt的制备 1氮掺杂石墨烯量子点N-GQDs的制备:称取柠檬酸和尿素,加入纯水定容后搅拌均匀,高温加热一定时间,冷却后加入乙醇混合搅拌,待搅拌完全后,透析一段时间,将透析后的溶液,冷冻干燥得到N-GQDs粉末; 2N-GQDs-GP73Apt的制备:量取N-GQDs和GP73适配体GP73Apt,使用碳二亚胺EDACN-羟基琥珀酰亚胺NHS交联剂进行活化,在室温且避光的条件下,搅拌孵育一定时间,得到N-GQDs-GP73Apt溶液; 步骤2:荧光共振受体二硫化钼@二茂铁@钯纳米粒子MoS2@Fc@PdNPs的制备及荧光电化学生物传感器的构建 1称量MoS2粉末,加入N,N-二甲基甲酰胺溶液DMF定容,放入超声细胞破碎机中破碎,至MoS2粉末完全分散在DMF中,得MoS2分散液;称量巯基乙胺,加入至MoS2分散液搅拌完全后,离心,将分离出的沉淀物洗涤,干燥得MoS2-NH2粉末; 2称量MoS2-NH2粉末和二茂铁Fc粉末,混合配置成溶液,加入交联剂溶液,搅拌完全后离心,将分离出的沉淀物洗涤,干燥得MoS2-Fc粉末; 3称量MoS2-Fc粉末、Na2PdCI6、抗坏血酸AA和羧甲基纤维素钠CMC并各自配制成溶液,将配制出的溶液混合,并搅拌一段时间,将所得溶液离心,将分离出的沉淀物洗涤,干燥得MoS2@Fc@PdNPs粉末; 4称量MoS2@Fc@PdNPs粉末并配制成溶液,将MoS2@Fc@PdNPs溶液和N-GQDs-GP73Apt溶液进行混合,在一定温度下避光环境孵育一段时间,形成N-GQDs-GP73AptMoS2@Fc@PdNPs荧光电化学生物传感器;离心,取上层液用荧光分光光度计进行扫描,记录其荧光强度F0,将下层液滴在活化的丝网印刷电极,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰位电流值C0; 步骤3:GP73工作曲线的绘制 1将不同浓度的GP73溶液加入到N-GQDs-GP73AptMoS2@Fc@PdNPsFRET荧光电化学生物传感器溶液中,在一定温度下避光环境孵育一段时间后,离心,取上层液用荧光分光光度计进行扫描,记录其荧光强度F1;将下层液滴在活化的丝网印刷电极,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰位电流值C1; 2用F1-F0F0作为纵坐标,GP73浓度作为横坐标,绘制工作曲线,计算出该荧光电化学生物传感器在荧光检测方面的最低检测限;用△C即C1-C0值作为纵坐标,GP73浓度作为横坐标,绘制工作曲线,计算出该荧光电化学生物传感器在电化学检测方面的最低检测限; 步骤4:实际血清样品中GP73的检测 1收集各种已知GP73浓度的血清样本,将待测血清样品加入到步骤2中的N-GQDs-GP73AptMoS2@Fc@PdNPsFRET荧光电化学生物传感器溶液中,在一定温度下避光环境孵育一段时间后,离心,取上层液用荧光分光光度计进行扫描,固定激发波长为348nm,测量其438nm处荧光强度;将下层液滴在活化的丝网印刷电极,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰位电流值; 2根据步骤3所得到的GP73的工作曲线,计算待测血清样品中GP73的浓度。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人广东石油化工学院,其通讯地址为:525000 广东省茂名市茂南区官渡二路139号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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