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龙图腾网获悉东莞市东南部中心医院申请的专利一种基于锁环探针的荧光定量PCR检测基因突变位点的试剂盒及检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115927573B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310019274.4，技术领域涉及：C12Q1/6876；该发明授权一种基于锁环探针的荧光定量PCR检测基因突变位点的试剂盒及检测方法是由陈章权;佃东春;余路新;孙元中;邓玉玲;汤子彬;何素辉;张伟龙;钟阳青;许瑶设计研发完成，并于2023-01-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于锁环探针的荧光定量PCR检测基因突变位点的试剂盒及检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于锁环探针的荧光定量PCR检测基因突变位点的试剂盒及检测方法。本发明将RCA技术中的锁环探针连接技术与实时荧光定量PCR技术相结合，利用锁环探针连接特性检测点突变，利用qPCR技术实现信号扩增放大，灵敏度高、特异性好，已对SARS‑cov2‑Delta突变株的T478K突变位点、地贫的CD17突变位点和结核杆菌利福平耐药株rpoB基因531突变位点实现检测；其中SARS‑cov2的最低检测限可达54.9fM，地贫和结核耐药的检测限分别为95.35zM、55.12aM。该方法还可广泛应用于其他的疾病相关的基因突变位点的检测。

本发明授权一种基于锁环探针的荧光定量PCR检测基因突变位点的试剂盒及检测方法在权利要求书中公布了：1.padlock探针和引物在制备检测SARS-cov2-Delta株T478K突变位点的试剂盒中的用途，其特征在于，所述padlock探针的序列如下所示： PadlockT478K：5’pTGCTACCGGCCTGATAGATTTCAGTTGAGTGGAACCGAGGAAATAGAGAACCCCATCCAGCACTTCCCtatgTCTCTCCCACATCGTTTCTTTCAACACCATTACAAGGTT-3’； 所述引物，包括上游引物和下游引物： 所述上游引物序列：5’-CCATCCAGCACTTCCCTATGTCT-3’； 所述下游引物序列：5’-GGTTCTCTATTTCCTCGGTTCCAC-3’； 所述试剂盒中包含TaqMan探针； 所述TaqMan探针的序列为：5’-CTCCCACATCGTTTCT-3’； 所述用途包含以下步骤：S1：探针的连接：将padlock探针和待检测的目标DNA进行杂交，在连接酶的作用下连接成环；S2：探针的扩增，采用引物对步骤S1中生成的连接产物进行荧光定量PCR扩增； 所述步骤S1的反应体系包括：1～100nM锁环探针0.5~1.5μL、1aM~100nMDNA模板0.5~1.5μL、3~5UTaqDNALigase1~3μL、0.5~1.5μL连接反应缓冲液和DEPC处理水，补充水至10μL。

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