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龙图腾网获悉江苏省中国科学院植物研究所申请的专利一种悬钩子属种间杂交种质的鉴定方法及鉴定用引物获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115852030B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211424935.3，技术领域涉及：C12Q1/6895；该发明授权一种悬钩子属种间杂交种质的鉴定方法及鉴定用引物是由张春红;吴文龙;吴雅琼;闾连飞;黄正金;王小敏;杨海燕设计研发完成，并于2022-11-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种悬钩子属种间杂交种质的鉴定方法及鉴定用引物在说明书摘要公布了：本发明公开了一种悬钩子种间杂交种质的鉴定方法，包括以下步骤：以六倍体栽培黑莓为母本，以二倍体野生悬钩子为父本，获取杂交种子，培育获得种间杂交苗；设计父本SSR引物，对种间杂交苗DNA进行扩增，筛选引物组合鉴别出真杂交种；将筛选出的SSR引物对在野生悬钩子、树莓、黑莓品种中进行扩增条带验证，优选出鉴别不同野生悬钩子父本杂交后代的特异引物。用筛选出的SSR引物对黑莓栽培品种和悬钩子种间杂交苗进行鉴定，根据扩增条带鉴别真杂交种和确认亲本种质来源。本发明首次实现将二倍体野生悬钩子与六倍体栽培黑莓品种杂交成功，利用筛选获得的SSR分子标记进行杂交种鉴别，并验证了野生种质通过杂交进入栽培品种。

本发明授权一种悬钩子属种间杂交种质的鉴定方法及鉴定用引物在权利要求书中公布了：1.一种悬钩子种间杂交种质的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）获取杂交种子：以六倍体栽培黑莓为母本，以二倍体野生悬钩子为父本，进行人工杂交后获得种子；将种子进行培育获得种间杂交苗木；所述六倍体栽培黑莓选自黑莓品种‘双季黑莓’，二倍体野生悬钩子选自‘蓬蘽’； （2）引物设计：采集父本幼嫩叶片进行转录组测序，设计若干对SSR引物； （3）引物筛选：将步骤（2）设计的SSR引物对步骤（1）中所有获得的种间杂交苗木进行验证筛选，利用在双亲中扩增的带型鉴别出杂交成功的真杂交种质，并筛选出能够鉴别出真杂交种的特异SSR引物；筛选出的特异SSR引物为Rh-11、Rh-20、Rh-21、Rh-34，Rh-11正向引物为5’-CGGTGCCTCTCTCTCTCTCT-3’,Rh-11反向引物为5’-CGGAACCAAACCCATCATCG-3’；Rh-20正向引物为5’-AAAGACCCAGCTATGTGCCC-3’,Rh-20反向引物为5’-GCTTTTGCACAAAGAGGAAGA-3’；Rh-21正向引物为5’-AATCCAGCTCATGTGCCTCA-3’，Rh-21反向引物为5’-TCTGTCGGACTGCAGACAAC-3’；Rh-34正向引物为5’-CTCTCTCCTCTGCCCCTCTT-3’，Rh-34反向引物为5’-CTCTTATCCTCGCCGTCGAC-3’； （4）扩增验证：将步骤（2）设计的SSR引物对步骤（1）中所有获得的种间杂交苗木进行验证筛选，从中筛选出的仅在父本中有扩增条带且在母本中没有条带的特异SSR引物，进一步在其他野生悬钩子、树莓、黑莓品种中进行扩增比较验证，进一步确认能够特异识别来自不同野生悬钩子亲本的杂交种质的引物；进一步筛选出的SSR引物为Rh-2、Rh-3、Rh-4、Rh-16，Rh-2正向引物为5’-AAGCGCGACAACGAAAAGAC-3’,Rh-2反向引物为5’-ACAAGTAAAGCATGCAACAGGT-3’；Rh-3正向引物为5’-TGGCACACAGTCACACAGAT-3’,Rh-3反向引物为5’-TCTGCCTCTGGTTTCCTTTCC-3’；Rh-4正向引物为5’-CTCACACCCGTCTGCTTCAT-3’，Rh-4反向引物为5’-ATTTCTGTGGTGCTCTCGCA-3’；Rh-16正向引物为5’-ACACAAACGACTTGGCTTGTG-3’,Rh-16反向引物为5’-GACTCTTGGCCCTAGTGCTG-3’； （5）杂交种质鉴定：将步骤（4）中进一步筛选出的SSR引物对种间杂交幼苗进行分子标记鉴定，能够扩增出条带的即为真杂交种。

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