南京工业大学陈勇获国家专利权
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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116064341B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210819917.9,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌是由陈勇;刘伟;应汉杰;陈天鹏;孙文俊;余斌设计研发完成,并于2022-07-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌在说明书摘要公布了:本发明公开了异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌;所述重组谷氨酸棒杆菌的构建方法,包括以下步骤:1扩增目的基因cspB;2将目的基因cspB克隆到质粒pXMJ19的XbaI酶与Kpnl酶的两个酶切位点之间,得到重组质粒pXMJ19‑cspB;3将重组质粒pXMJ19‑cspB转化到大肠杆菌DH5α感受态中,筛选得含重组质粒pXMJ19‑cspB的大肠杆菌,再提取重组质粒pXMJ19‑cspB;4将提取得到的重组质粒转化到谷氨酸棒杆菌感受态中。本发明将生物膜和固定化发酵技术相结合,同时缩短了发酵周期、实现了细胞的可循环使用,节约了成本。
本发明授权异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌在权利要求书中公布了:1.一株重组谷氨酸棒杆菌在固定化发酵产赖氨酸中的应用,其特征在于,所述重组谷氨酸棒杆菌为在原始谷氨酸棒杆菌ATCC13032中异源表达核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的cspB基因; 所述重组谷氨酸棒杆菌的构建方法,包括以下步骤: 1扩增目的基因cspB; 2将步骤1得到的目的基因cspB克隆到质粒pXMJ19的XbaI酶与Kpnl酶的两个酶切位点之间,得到重组质粒pXMJ19-cspB; 3将步骤2所得重组质粒pXMJ19-cspB转化到大肠杆菌DH5α感受态中,筛选得含重组质粒pXMJ19-cspB的大肠杆菌,再提取重组质粒pXMJ19-cspB; 4将步骤3提取得到的重组质粒转化到谷氨酸棒杆菌感受态中,即得到重组谷氨酸棒杆菌; 发酵培养基的组成为70%糖118-138mLL、硫酸铵35-55gL、硫酸镁0.2-2.2gL、糖蜜5-25mLL、玉米浆5-25mLL、磷酸二氢钾0.1-2.1gL、硫酸亚铁150-250mgL、硫酸锰100-200mgL、烟酰胺50-70mgL、泛酸钙5-15mgL、VB15-15mgL、硫酸铜0.5-1.5mgL、硫酸锌0.5-1.5mgL、生物素0.8-2.8mgL、碳酸钙20-40gL。
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