河南中医药大学李一帆获国家专利权
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龙图腾网获悉河南中医药大学申请的专利基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA超灵敏电化学检测试剂盒及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116990370B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310975018.2,技术领域涉及:C12Q1/68;该发明授权基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA超灵敏电化学检测试剂盒及应用是由李一帆;李坤华;张晨煜;崔真真;杨怀霞;郭亮;刘艳菊设计研发完成,并于2023-08-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA超灵敏电化学检测试剂盒及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA超灵敏电化学检测试剂盒及应用,该试剂盒包括以下原料:金电极、Aptamer、1,6己二硫醇、AgNPs、OTA抗体‑PEI溶液、NCA‑Fc单体。本发明通过Au‑S键将1,6己二硫醇修饰到金电极上,然后加入AgNPS将其修饰到HDT上,接着将一端修饰巯基的适配体与AgNPS连接,然后加入赭曲霉素A使其与适配体结合,之后加入OTA抗体‑聚乙烯亚胺,与OTA特异性识别,聚乙烯亚胺上的氨基引发ROP反应,形成大量电活性探针标记的聚合物。本发明基于AgNPS和ROP信号放大策略大大提高了检测灵敏度,且具有稳定性好以及重现性好的特点,在实际样品的检测中具有很大的潜力。
本发明授权基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA超灵敏电化学检测试剂盒及应用在权利要求书中公布了:1.基于AgNPs和ROP信号放大策略的OTA电化学检测试剂盒,其特征在于,包括以下原料:金电极、Aptamer、1,6己二硫醇、AgNPs、OTA抗体-PEI溶液、NCA-Fc单体; NCA-Fc单体的制备方法为: ①称取3mmol二茂铁甲酸溶于60mLDCM中,0℃条件下滴加6mmol三乙胺,再加入3mmolHBTU和3mmolHOBT,0℃反应1h后,旋转蒸干溶剂DCM,得到产物Fc-OBT; ②将1230µLTFA在0℃条件下滴入叔丁氧羰基-L-赖氨酸环内酸酐溶液中,0℃反应1h后,移入室温搅拌过夜,得到NCA产物; ③将6mmol三乙胺在0℃条件下滴入所制备的3mmolFc-OBT中,然后加入所制备的3mmolNCA,室温反应,通过薄层色谱法监测反应过程,反应结束后,依次用饱和NaHCO3溶液、0.5M盐酸溶液、饱和NaHCO3溶液和超纯水洗涤,DCM有机相萃取,用无水Na2SO4干燥、过滤,真空干燥,得到单体NCA-Fc; 所述试剂盒检测OTA的方法,包括以下步骤: (1)将金电极浸泡在1,6己二硫醇溶液中,反应; (2)将AgNPs溶液滴加到步骤(1)的电极上,反应; (3)将Aptamer溶液滴加到步骤(2)的电极上,反应; (4)将待检测样品溶液滴加到步骤(3)的电极上,反应; (5)将OTA抗体-PEI溶液滴加到步骤(4)的电极上,反应; (6)将NCA-Fc单体溶液滴加到步骤(5)的电极上,反应; (7)将步骤(6)的电极置于LiClO4溶液中测量电化学信号。
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