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龙图腾网获悉青岛大学申请的专利一种非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117256563B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-15发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310418895.X，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权一种非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法是由李宁;刘顺龙;丛琬芯;巩遵双;王彬设计研发完成，并于2023-04-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法，属于模型构建技术领域。本发明采用将动物肝脏的Eva1a基因特异敲除法建立非酒精性脂肪肝动物模型。本发明以Cre‑loxp技术作为示例建立非酒精性脂肪肝动物模型，构建得到的非酒精性脂肪肝动物模型，伴有脂肪肝、血脂异常等特征，与临床病理相似度高，且不区分雌性和雄性，都有显著脂肪肝表型。本发明所述非酒精性脂肪肝动物模型，无需高脂饲料喂养，成本低，效率高，可通过遗传的方式批量繁殖生产，鼠龄到10周即出现脂肪肝表型，能够有效缩短非酒精性脂肪肝动物模型的建立周期，极大节约NAFLD的医学研究的时间成本。

本发明授权一种非酒精性脂肪肝动物模型的构建方法在权利要求书中公布了：1.一种利用Cre-loxP方法构建非酒精性脂肪肝动物模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：1以构建得到的Eva1afloxflox动物和携带Cre工具动物为亲本进行杂交，获得F1代；所述工具动物中携带的Cre利用在肝脏特异性表达的Alb启动子启动表达； 2筛选F1代中基因型为Eva1aflox+-Cre+动物与所述Eva1afloxflox动物杂交，获得F2代； 3筛选F2代中基因型为Eva1aflox++Cre+的动物，得所述非酒精性脂肪肝动物模型；所述筛选包括通过gt3、gt5和Cre基因的引物对进行PCR法鉴定； 利用gt3的引物对进行PCR，出现单一条带； 利用gt5的引物对进行PCR，只有一条带鉴定为Eva1aflox++纯合子；若出现两条带，为Eva1aflox+-杂合子； 利用Cre的引物对进行PCR，出现条带鉴定为Cre+； 针对gt3设计的引物对包括核苷酸序列如SEQIDNo.1所示的gt3-F和核苷酸序列如SEQIDNo.2所示的gt3-R； 针对gt5设计的引物对包括核苷酸序列如SEQIDNo.3所示的gt5-F和核苷酸序列如SEQIDNo.4所示的gt5-R； 针对Cre设计的引物对包括核苷酸序列如SEQIDNo.5所示的Cre-F和核苷酸序列如SEQIDNo.6所示的Cre-R。

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