姚建铭获国家专利权
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龙图腾网获悉姚建铭申请的专利一种高产乳酰-N-新四糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115851570B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-15发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211701818.7,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种高产乳酰-N-新四糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用是由姚建铭设计研发完成,并于2022-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高产乳酰-N-新四糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明属于微生物基因工程技术领域,公开了一种高产乳酰‑N‑新四糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用。本发明的高产乳酰‑N‑新四糖的大肠杆菌工程菌株过表达重组基因,所述重组基因包括β‑1,3‑N‑乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶基因lgtA、UDP葡萄糖4差向异构酶基因galE、β1,4半乳糖基转移酶基因,通过质粒组合优化、蛋白标签共同表达、相关基因敲除以及基因组整合等手段从而提高LNnT产量。本发明选出大肠杆菌工程菌株在摇瓶发酵中LNnT的产量由0.67gL提高至2.66gL,5L罐发酵最高LNnT产量达17.26gL。
本发明授权一种高产乳酰-N-新四糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种高产乳酰-N-新四糖的大肠杆菌工程菌株,其特征在于,所述大肠杆菌工程菌株敲除β-半乳糖苷酶基因lacZ、磷酸十一碳基葡萄糖磷酸转移酶基因wcaj和gdp-甘露糖甘露糖水解酶基因nudD;所述大肠杆菌工程菌株过表达重组基因,所述重组基因包括β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶基因lgtA、UDP-葡萄糖4差向异构酶基因galE和β-1,4-半乳糖基转移酶基因;所述β-1,4-半乳糖基转移酶基因为hpgalT-1; 所述β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶基因lgtA的Genbank登录号为NP_274923;所述UDP-葡萄糖4差向异构酶基因galE的Genbank登录号为NP_415280.3;所述β-1,4-半乳糖基转移酶基因为hpgalT-1的Genbank登录号为BAA88524.1; 所述β-1,4-半乳糖基转移酶基因hpgalT-1的表达载体为pETDuet-1; 所述β-1,4-半乳糖基转移酶基因hpgalT-1的N端插入有融合标签Fh8; 所述β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶基因lgtA和UDP-葡萄糖4差向异构酶基因galE的表达载体为pRSFDuet-1; 所述大肠杆菌工程菌株还敲除葡萄糖-1-磷酸酶基因agp、海藻糖-6-磷酸合成酶基因otsA、UDP葡萄糖6-脱氢酶基因ugd、生物膜PGA合成酶基因pgaCD、葡糖胺-6-磷酸脱氨酶基因nagB、UDP-N-乙酰氨基葡糖十一烷基磷酸N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶基因wecA、UDP-N-乙酰葡糖胺2-二聚体酶基因wecB、甘露糖-6-磷酸异构酶基因manA和NADP+依赖性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因zwf。
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