杭州纽龙生物科技有限公司邵冯金获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州纽龙生物科技有限公司申请的专利一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120271696B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510771770.4,技术领域涉及:C07K14/79;该发明授权一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法是由邵冯金;高振飞;厉东方;钱永常;来灿钢设计研发完成,并于2025-06-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法,包括以下步骤:(1)将人乳铁蛋白的C叶片段基因序列插入至pET28a质粒中形成重组质粒pET28a‑rhLF;(2)以重组质粒pET28a‑rhLF为模板,扩增获得改造后的目的基因;(3)以质粒pET28g为模板,扩增获得改造后的载体;(4)将改造后的目的基因与改造后的载体进行重组连接,转入DH5α中获得重组质粒;(5)转入大肠杆菌BL21中获得大肠杆菌工程菌株;(6)发酵培养,诱导表达重组人乳铁蛋白。本发明能够在大肠杆菌表达系统中的高效表达具有生物活性的重组人乳铁蛋白,成本低,产量高,适合工业化生产。
本发明授权一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法在权利要求书中公布了:1.一种基于大肠杆菌载体的重组人乳铁蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)以SEQIDNO:1所示的重组人乳铁蛋白为目标进行重组表达,将重组人乳铁蛋白的基因序列插入至pET28a质粒中形成重组质粒pET28a-rhLF; (2)以重组质粒pET28a-rhLF为模板,设计第一改造引物进行PCR,获得改造后的目的基因; (3)以质粒pET28g为模板,设计第二改造引物进行PCR,获得改造后的载体; (4)将步骤(2)得到的改造后的目的基因与步骤(3)得到的改造后的载体进行重组连接,将重组连接产物转入DH5α中,培养,提取,获得重组质粒; (5)将重组质粒转入大肠杆菌BL21中获得高效表达重组人乳铁蛋白的大肠杆菌工程菌株; (6)将高效表达重组人乳铁蛋白的大肠杆菌工程菌株进行发酵培养,诱导表达重组人乳铁蛋白;表达产物经纯化后,获得重组人乳铁蛋白;重组人乳铁蛋白的氨基酸序列见SEQIDNO:1所示。
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