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龙图腾网获悉鼐济医药科技(杭州)有限公司申请的专利一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120272531B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510766997.X，技术领域涉及：C12N15/864；该发明授权一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法是由张忠亮;方舒婷;张本佳设计研发完成，并于2025-06-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法，包括：选择适龄的免疫缺陷小鼠；注射人源CD34+造血干细胞进行免疫系统重建；检测外周血PBMC中的人CD45+免疫细胞；选择高表达脑胶质瘤标志基因的肿瘤组织，进行快速qPCR或靶向RNA‑seq免疫组化多重验证，筛选符合的肿瘤组织；将肿瘤组织进行物理切块并经预处理液处理后，消化成单细胞悬液，接种于小鼠颅内；向小鼠尾静脉注射携带特定免疫调控基因的AAV载体，调控脑胶质瘤免疫微环境；当观察到肿瘤组织稳定生长并具有免疫细胞浸润特征时，完成脑胶质瘤动物模型的构建。与现有模型相比，本发明提供了一种更稳定、更科学、更贴近人类免疫背景的脑胶质瘤模型，适用于相关免疫治疗药物筛选及机制研究。

本发明授权一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法在权利要求书中公布了：1.一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤： 选择适龄的免疫缺陷小鼠； 通过尾静脉注射人源CD34+造血干细胞进行免疫系统重建； 采用流式细胞术检测外周血PBMC中的人CD45+免疫细胞，确认免疫系统重建成功； 选择高表达脑胶质瘤标志基因的肿瘤组织，进行快速qPCR或靶向RNA-seq免疫组化多重验证，筛选符合脑胶质瘤动物模型的肿瘤组织； 将筛选出的肿瘤组织进行物理切块并经预处理液处理后，消化成单细胞悬液，采用立体定位注射方法将单细胞悬液接种于小鼠颅内； 向小鼠尾静脉注射携带特定免疫调控基因的AAV载体，调控脑胶质瘤免疫微环境，当检测到小鼠体内AAV表达产物稳定表达时，完成AAV表达产物介导的免疫调控； 当观察到肿瘤组织稳定生长并具有免疫细胞浸润特征时，确认免疫微环境重构与肿瘤生长符合模型构建要求，完成脑胶质瘤动物模型的构建； 所述AAV载体包括AAV-TGFβ1-P2A-IL10表达盒和AAV-CSF1表达盒，用于表达TGF-β1、IL10和CSF1基因； 所述AAV-TGFβ1-P2A-IL10表达盒包括由CAG启动子驱动的TGF-β1基因与IL10基因通过P2A自切割肽序列共表达的核酸结构，核酸序列总长度为3.1±0.2kb； 所述AAV-CSF1表达盒包括由CAG启动子驱动的CSF1基因表达单元，核酸序列总长度为2.3±0.2kb。

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