四川大学邓洪新获国家专利权
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龙图腾网获悉四川大学申请的专利一种共分化的血管化肝类器官及其构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120158421B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510649748.2,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种共分化的血管化肝类器官及其构建方法是由邓洪新;张琳;柏雪;陈双;任玉霜;魏于全设计研发完成,并于2025-05-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种共分化的血管化肝类器官及其构建方法在说明书摘要公布了:本发明属于类器官培养技术领域,具体涉及一种共分化的血管化肝类器官及其构建方法。针对现有肝类器官血管化大多采用共培养方式,操作流程复杂、细胞来源异质性较高、且具有随机性强、均一差等问题,本发明提供了一种共分化的血管化肝类器官的构建方法,将人诱导性多能干细胞hiPSCs,依次诱导培养成定向内胚层细胞、后前肠细胞、肝内胚层细胞后,加入含VEGF的S1培养基诱导培养1‑3天,再加入含VEGF、BMP4和FGF2的S2培养基诱导培养3‑5天,再加入含VEGF的S3培养基诱导培养14‑20天,得到共分化的血管化肝类器官。本发明方法简化了操作流程,提高了实验效率,获得了具有丰富血管网络、成熟度高、具有血管‑胆管结构的肝类器官,为大规模生产和临床应用奠定了基础。
本发明授权一种共分化的血管化肝类器官及其构建方法在权利要求书中公布了:1.一种共分化的血管化肝类器官的构建方法,其特征在于,包括以下步骤: 将人诱导性多能干细胞hiPSCs,加入DE诱导培养基诱导培养成定向内胚层细胞,加入PGEC诱导培养基诱导培养成后前肠细胞,加入HE培养基诱导培养成肝内胚层细胞后,加入含VEGF的S1培养基诱导培养1-3天,再加入含VEGF、BMP4和FGF2的S2培养基诱导培养3-5天,再加入含VEGF的S3培养基诱导培养14-20天,得到共分化的血管化肝类器官;所述的DE诱导培养基的组成包括:RPIM1640基础培养基中,加入终浓度为100ngmL的激活素AActivinA和3μM的Wnt激活剂ChiR99021;所述的PGEC诱导培养基的组成包括:DMEMF12基础培养基中,加入终浓度为1%的N2、1%的B27、100UmL的青霉素-链霉素、2mM谷氨酰胺、15mMHepes、500ngmLFGF4和3μMChiR99021;所述的HE培养基的组成包括:RPMI-1640基础培养基中,加入终浓度为1%的B27、100UmL的青霉素-链霉素、10ngmLbFGF和20ngmLBMP4;所述S1培养基的组成包括:advancedDMEMF12基础培养基中,加入终浓度为1%谷氨酰胺、1%N2补充剂、1%B27补充剂、100UmL青霉素-链霉素、10nM4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液Hepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmL表皮细胞生长因子EGF、25ngmL肝细胞生长因子HGF、3μMA83-01、10mM烟酰胺、10μM毛喉素Forskolin、10-100ngmLR-脊椎蛋白R-spondin、50-100ngmL成纤维细胞生长因子10FGF10、25-100ngmlVEGF;所述S2培养基的组成包括:advancedDMEMF12基础培养基中,加入终浓度为1%谷氨酰胺、1%N2补充剂、1%B27补充剂、100UmL青霉素-链霉素、10nMHepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmLEGF、25ngmLHGF、3μMA83-01、10mM烟酰胺、10μMForskolin、10-100ngmLR-spondin、50-100ngmLFGF10、25-100ngmlVEGF、10-100ngmlBMP4、10-100ngmlFGF2;所述S3培养基组成包括:advancedDMEMF12基础培养基中,加入终浓度为1%谷氨酰胺、1%N2补充剂、1%B27补充剂、100UmL青霉素-链霉素、10nMHepes、1mMN-乙酰半胱氨酸、10nM人胃泌素I、50ngmLEGF、25ngmLHGF、3μMA83-01、10mM烟酰胺、10μMForskolin、10-100ngmLR-spondin、50-100ngmLFGF10、5-20ngmlVEGF。
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