杭州海关技术中心;浙江省检验检疫科学技术研究院帅江冰获国家专利权
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龙图腾网获悉杭州海关技术中心;浙江省检验检疫科学技术研究院申请的专利一种猪腹泻病原体多重核酸质谱检测的引物和探针组、试剂盒和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120174154B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510637444.4,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种猪腹泻病原体多重核酸质谱检测的引物和探针组、试剂盒和应用是由帅江冰;张晓峰;韩笑;孔朋莉;金晨晨设计研发完成,并于2025-05-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猪腹泻病原体多重核酸质谱检测的引物和探针组、试剂盒和应用在说明书摘要公布了:本发明涉及分子生物学检测技术领域,尤其涉及一种猪腹泻病原体多重核酸质谱检测的引物和探针组、试剂盒和应用。本发明采用基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱技术,能够同时快速、灵敏、特异地检测PEDV、TGEV、PDCoV、PoRV、SADS‑CoV、PBoV、HEV和沙门氏菌等8种主要病原体。通过设计特异性引物和未扩展探针,结合多重PCR扩增和质谱分析,本方法实现了高通量、多病原体的同时检测。实验结果表明,所述方法具有高灵敏度和高特异性,无假阳性反应,并在60次重复实验中显示出100%的重复性。与qPCR方法的比较显示,检测一致性高达96.2%。该方法具有操作简便、检测速度快、适应性强的优点,可广泛应用于猪腹泻病原体的高效监测,为猪疾病的早期诊断和防控提供了重要的技术支持。
本发明授权一种猪腹泻病原体多重核酸质谱检测的引物和探针组、试剂盒和应用在权利要求书中公布了:1.一种基于MALDI-TOFNAMS法猪腹泻病原体多重检测的PCR引物和探针组,猪腹泻病原体为猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)、戊型肝炎病毒HEV、猪轮状病毒PoRV、猪博卡病毒PBoV和沙门氏菌(Salmonella);其特征在于,PCR引物和探针如下所述: PDCoV:上游引物的核苷酸序列为catatcctgtggcggatttc,下游引物的核苷酸序列为cagtcgttaagcatggcaag,探针的核苷酸tacatgggcaagagc; PEDV:上游引物的核苷酸序列为aaataaccagggtcgtggag,下游引物的核苷酸序列为tcttggactggttacgagac,探针的核苷酸cattattattgcctcctc; TGEV:上游引物的核苷酸序列为tgtgatggagtatgggtatc,下游引物的核苷酸序列为cattgtattgggattatgc,探针的核苷酸gggaacggttaaacgtagt; SADS-CoV:上游引物的核苷酸序列为ggcttactctaaacccagtc,下游引物的核苷酸序列为ttgggaaactggagtagctg,探针的核苷酸acactggggcatcagcattt; HEV:上游引物的核苷酸序列为tggttggatgaatataggg,下游引物的核苷酸序列为agtgccggcggtggtttctg,探针的核苷酸gtggtttctggggtgac; PoRV:上游引物的核苷酸序列为gtcaatcagactctacaag,下游引物的核苷酸序列为ggtcacatcctctcacta,探针的核苷酸cccagttactctacgtagcg; PBoV-G1:上游引物的核苷酸序列为gtgtttggttgtttgtccc,下游引物的核苷酸序列为gacacagtatggcaataccc,探针的核苷酸gggacccaatgcaagcatgga; PBoV-G2:上游引物的核苷酸序列为aaaagccacgctcatgcag,下游引物的核苷酸序列为ggtaacgccaaacgtgtttc,探针的核苷酸tgtttcccatcggta; PBoV-G3:上游引物的核苷酸序列为cccaacagttttcctctagc,下游引物的核苷酸序列为agtagtgtgaggcaggtaac,探针的核苷酸ccacaaggtccttgagcg; Salmonella:上游引物的核苷酸序列为tagaacgaccccataaacac,下游引物的核苷酸序列为tccattacctacctatctgg,探针的核苷酸acctatctggttgatt。
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