贵州大学范付华获国家专利权
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龙图腾网获悉贵州大学申请的专利一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115808336B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211397909.6,技术领域涉及:G01N1/28;该发明授权一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法是由范付华;杨超;丁贵杰设计研发完成,并于2022-11-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法,涉及切片技术领域。本发明的方法能够广泛用于不同龄级、不同树种的高木质化、高异质化材料的石蜡切片制备,克服了当前以石蜡切片制作高木质化、高异质化材料时切片破裂、卷曲、不完整的问题,本发明所制成的切片结构完整、清晰,适用性极高,为观察树木茎干的次生生长过程奠定了基础。
本发明授权一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法在权利要求书中公布了:1.一种高木质化、高异质化材料的石蜡切片制作方法,其特征在于,包括以下步骤: 1取样及固定 将材料取样后放入FAA固定液中,抽真空后置于4℃环境固定72h以上; 2软化 将固定处理后的材料置于盐酸-乙醇软化液或NaOH-乙醇软化液中进行第一次软化,之后利用70vol%乙醇置换软化液,置换完成后,将材料置于甘油-乙醇软化液中进行第二次软化; 所述盐酸-乙醇软化液为36%浓盐酸和无水乙醇体积比2:3的混合物; 所述NaOH-乙醇软化液为NaOH与70vol%乙醇质量体积比24g:100mL的混合物; 所述甘油-乙醇软化液为70vol%乙醇和丙三醇体积比1:1的混合物; 3脱水 材料软化结束后,重复3次放入70vol%乙醇进行脱水及软化液置换,每次2h,前两次放入35℃烘箱处理,最后一次结束后室温过夜;次日以70vol%-2h、85vol%-2h、95vol%-2h、100vol%-1h、100vol%-1h的乙醇浓度体积浓度及时间梯度逐级进行脱水; 4透明 将脱水后的材料在50vol%二甲苯+50vol%无水乙醇中过渡,之后利用二甲苯进行透明,之后将材料置于50vol%二甲苯+50vol%石蜡的混合溶液中在40℃下过夜; 5浸蜡 在60℃条件下对材料进行浸蜡处理; 6包埋 利用石蜡对浸蜡完成后的材料进行包埋; 7切片、贴片及烤片 将包埋后的材料在50vol%甘油+50vol%水溶液中静置,之后进行切片、贴片、烤片,然后染色处理; 8封片处理: 将染色后的切片依次经95vol%乙醇溶液、100vol%乙醇溶液、50vol%二甲苯+50vol%无水乙醇、2次二甲苯溶液逐级处理,然后以中性树胶封片; 所述第一次软化的温度为55℃,时间为1-4h;所述第二次软化的温度为50℃,时间为2-5d。
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