石家庄博瑞迪生物技术有限公司蓝昊发获国家专利权
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龙图腾网获悉石家庄博瑞迪生物技术有限公司申请的专利在回交分析中对RppK的检测方法及液相芯片和试剂盒获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119864077B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411918270.0,技术领域涉及:G16B20/30;该发明授权在回交分析中对RppK的检测方法及液相芯片和试剂盒是由蓝昊发;何伊琳;董佳慧;康静童;叶伟健;许彦芬;张嘉楠设计研发完成,并于2024-12-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本在回交分析中对RppK的检测方法及液相芯片和试剂盒在说明书摘要公布了:本发明涉及玉米育种技术领域,具体公开了在回交分析中对RppK的检测方法及液相芯片和试剂盒,包括以下步骤:S1、找出RppK基因在R3上的变异位点,并从中筛选出23个SNP变异位点和4个INDEL变异位点,构成特异性变异位点,如说明书中的表1所示;分别截取27个异性变异位点对应的序列,获得24条特异位点序列,24条特异位点序列分别如SEQIDNO.1‑SEQIDNO.24所示;S2、将24条特异位点序列与目标材料的序列信息进行比对,根据比对结果判断目标材料是否含有RppK基因。本发明不仅能检测玉米中RppK基因,以实现对种质资源进行鉴定,筛选抗病种质;且具有效率高和预见性好的优点。
本发明授权在回交分析中对RppK的检测方法及液相芯片和试剂盒在权利要求书中公布了:1.在回交分析中对RppK的检测方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、找出RppK基因在R3上的变异位点,并通过对多种玉米材料的参考基因组进行比较,从找出的变异位点中筛选出23个SNP变异位点和4个INDEL变异位点,构成特异性变异位点,所述特异性变异位点如表1所示;分别截取27个特异性变异位点对应的序列,获得24条特异位点序列,24条特异位点序列分别如SEQIDNO.1-SEQIDNO.24所示; S2、将24条特异位点序列与目标材料的序列信息进行比对,根据比对结果判断目标材料是否含有RppK基因; 步骤S1中,截取特异位点序列的方式如下: 对于SNP变异位点,取其左右70bp,共141bp的序列作为特异位点序列; 对于INDEL变异位点,将4个INDEL变异位点放在同一条序列内,取得共313bp的序列; 步骤S2中,判断目标材料是否含有RppK基因包括以下步骤: S21、过滤比对结果并进行计数: 统计满足以下条件的目标材料的测序片段数量: A对于SNP变异位点,要求100%全长正确比对; B对于INDEL变异位点,要求目标材料的测序片段覆盖INDEL特异位点序列且比对相似度大于98%; S22、先后根据SNP和INDEL的计数情况作出RppK基因有无判断: 根据以下条件判断目标材料是否含有RppK基因: 1对于单个SNP变异位点,要求满足条件A的记录大于5条; 2对于所有SNP变异位点,要求满足条件1的占比大于等于80%; 3对于单个INDEL变异位点,要求满足条件B的记录大于5条; 如果目标材料的测序结果不能同时满足上述条件1和2,则判定为感病,即材料中不含RppK基因;如果同时满足上述条件1-3,则判定为抗病,即材料中含有RppK基因;如果同时满足上述条件1和2但不满足条件3,则不确定材料中是否含有RppK基因; 表1
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