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生态环境部南京环境科学研究所倪妮获国家专利权

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龙图腾网获悉生态环境部南京环境科学研究所申请的专利一种水中微塑料表面DNA的提取方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118389490B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410545101.0,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种水中微塑料表面DNA的提取方法是由倪妮;邱靖昊;王娜;袁青彬;郭欣妍;朱长青设计研发完成,并于2024-05-06向国家知识产权局提交的专利申请。

一种水中微塑料表面DNA的提取方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种水中微塑料表面DNA的提取方法,通过将水样中微塑料进行分离使微塑料富集于滤膜a上,随后对滤膜a的微塑料上胞内DNA和胞外DNA进行分离处理分别得到含有胞内DNA的滤膜b、含有胞外DNA的滤液;对含有胞内DNA的滤膜b进行胞内DNA的提取,对含有胞外DNA的滤液进行胞外DNA的提取。本发明能够为微塑料的研究提供新的研究方式,通过将微塑料浮选分离然后通过分离处理获取得到含有胞内DNA的滤膜b、含有胞外DNA的滤液,从而能够在后续分别获取得到胞内DNA和胞外DNA,从而为微塑料表面DNA的探究提供实验分析基础样本。

本发明授权一种水中微塑料表面DNA的提取方法在权利要求书中公布了:1.一种水中微塑料表面DNA的提取方法,其特征在于,通过将水样中微塑料进行分离使微塑料富集于滤膜a上,随后对滤膜a的微塑料上胞内DNA和胞外DNA进行分离处理分别得到含有胞内DNA的滤膜b、含有胞外DNA的滤液;对含有胞内DNA的滤膜b进行胞内DNA的提取,对含有胞外DNA的滤液进行胞外DNA的提取; 所述分离处理的方法为: S201、将浮选所得滤膜a剪成多个竖条,并放入离心管中,并向其中加入PBS缓冲液,超声并涡旋处理,处理总时长15min,使微塑料从滤膜a上解吸; S202、使用PBS缓冲液冲洗滤膜a,并丢弃滤膜a,再次涡旋15min,使DNA从微塑料上解吸,将溶液抽滤过0.22μm的滤膜b,得到含有胞内DNA的滤膜b、含有胞外DNA的滤液; 在所述超声前,调节PBS缓冲液的温度在室温,向离心管中投加占PBS缓冲液体积21%的控温微珠,控温微珠的温度控制在10℃,进行45℃的超声处理并不断搅拌; 控温微珠是由厚度为1mm的陶瓷外壳以及相变蓄冷内核构成的直径1cm微球,相变蓄冷材料封装于塑料薄壳中,相变蓄冷内核直径为8mm,且塑料薄壳一侧球面嵌设有面积为13球面的导冷用的铜皮,且另一侧球面设有配重块,用于相变蓄冷内核的在陶瓷外壳内进行偏心转动; 在超声处理的前3s内,将PBS缓冲液由室温迅速升温至45℃,保持2s后,分多次投加控温微珠直至超声处理结束; 其中,控温微珠按质量百分比分阶段投加至PBS缓冲液,具体为: 1在超声处理的前3s内,投加控温微珠的量为65%; 2在超声处理的保持2s后,单次投加控温微珠的量为5%; 在所述超声并涡旋中,超声处理25s,处理总时长15min;并且,超声的强度为2.5Wcm2,超声的频率为20kHz; 水样中微塑料进行分离使微塑料富集于滤膜a上的方法为: S101、将水样中的采样网兜取出并将采样网兜上的采集物刮取到烧杯中,并配置饱和氯化钠溶液; S102、随后以饱和氯化钠溶液作为浮选液进行浮选,浮选结束后,将培养皿中的浮选液抽滤过100μm的滤膜a,富集微塑料于滤膜a上。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人生态环境部南京环境科学研究所,其通讯地址为:210042 江苏省南京市玄武区蒋王庙街8号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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