江南大学刘龙获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种高效生产5’-肌苷酸的大肠杆菌及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118207147B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410458792.0，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种高效生产5’-肌苷酸的大肠杆菌及其应用是由刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;李小喜设计研发完成，并于2024-04-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高效生产5’-肌苷酸的大肠杆菌及其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种高效生产5’‑肌苷酸的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。为了减少大肠杆菌中5’‑肌苷酸的降解，通过CRISPRCas9系统进行了四个磷酸酶编码基因的敲除验证，并发现分别敲除UMP磷酸酶编码基因nagD和5’‑核苷酸酶编码基因ushA能够提升5’‑肌苷酸产量，之后为了抑制5’‑肌苷酸进一步转化成鸟苷酸和腺苷酸，单独敲除5’‑肌苷酸脱氢酶编码基因guaB，最终为了强化嘌呤合成过程中所需的甲酰基四氢叶酸的供给和利用，替换丝氨酸羟甲基转移酶编码基因glyA的启动子为Ptac，得到的重组大肠杆菌48h发酵5’‑肌苷酸产量达到2113.12mgL，且发酵过程不需要添加抗生素，具有广阔的应用前景。
本发明授权一种高效生产5’-肌苷酸的大肠杆菌及其应用在权利要求书中公布了：1.一种高效生产5’-肌苷酸的大肠杆菌，其特征在于：在所述大肠杆菌基因组中异源导入6-磷酸葡萄糖酸内酯酶编码基因pgl，将编码磷酸核糖焦磷酸激酶第128位天冬氨酸的密码子替换为丙氨酸密码子，将编码谷氨酸胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶第326位赖氨酸的密码子替换为谷氨酰胺密码子且将编码第410位脯氨酸的密码子替换为色氨酸密码，敲除或沉默阻遏蛋白编码基因purR和6-磷酸果糖激酶编码基因pfkA，过表达磷酸核糖焦磷酸激酶编码基因prs和谷氨酸胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶编码基因purF，敲除或沉默UMP磷酸酶编码基因nagD和5’-肌苷酸脱氢酶编码基因guaB； 在所述大肠杆菌基因组中过表达丝氨酸羟甲基转移酶编码基因glyA； 所述过表达使用Ptac启动子进行表达； 所述基因pgl的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示； 出发菌株为大肠杆菌BL21DE3。
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