汉诺生物科技(苏州)有限公司黄才岭获国家专利权
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龙图腾网获悉汉诺生物科技(苏州)有限公司申请的专利一种糖蛋白N-连接糖类型的鉴定和验证方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116242902B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310098001.3,技术领域涉及:G01N27/62;该发明授权一种糖蛋白N-连接糖类型的鉴定和验证方法是由黄才岭设计研发完成,并于2023-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种糖蛋白N-连接糖类型的鉴定和验证方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种糖蛋白N‑连接糖类型的鉴定和验证方法,包括如下步骤:制备完整N‑糖肽样本;完整N‑糖肽样本经电喷雾电离后得到前体离子,前体离子经气相解离得到碎片离子,对前体离子和碎片离子进行质谱分析;基于分子组成指纹比对的N‑连接糖单糖组成、潜在序列结构和类型的鉴定;基于N‑连接糖类型特征碎片离子的类型的筛选和确认;基于靶向‑诱饵库搜索的完整N‑糖肽鉴定的假阳性控制;N‑连接糖类型的鉴定和确认。该方法基于分子组成和结构指纹对糖蛋白上N‑连接糖的类型进行鉴定和确认,有效控制了相同分子组成但不同类型的N‑连接糖的区分和确认,在现有谱图水平假阳性控制的基础上增加了基于结构指纹的确认步骤,提高了N‑连接糖类型鉴定准确度。
本发明授权一种糖蛋白N-连接糖类型的鉴定和验证方法在权利要求书中公布了:1.一种糖蛋白N-连接糖类型的鉴定和验证方法,其特征在于,包括如下步骤: S1、从待解析生物样本中制备完整N-糖肽样本; S2、完整N-糖肽样本经电喷雾电离后得到前体离子,将前体离子送入质谱仪,得到包含前体离子同位素轮廓指纹的实验一级质谱图; S3、将前体离子的同位素轮廓指纹与对应的靶向正向理论数据库进行匹配,筛选出符合匹配条件的具有相同分子组成的单糖组成; S4、将前体离子送入离子阱中进行气相解离得到碎片离子,将碎片离子送入质谱仪,得到包含碎片离子同位素轮廓指纹的二级质谱图; S5、对相同单糖组成不同序列结构的N-连接糖的实验和理论碎片离子的分子组成指纹进行逐一同位素轮廓指纹比对; S6、自分子组成指纹相同但类型不同的N-连接糖中靶向地筛选和验证各自的特征碎片离子,即高甘露糖型和杂合型N-连接糖包含GlcNAc2Man4序列结构诊断碎片离子,复杂型N-连接糖不包含该特定的碎片离子; S7、对经过序列结构特征诊断碎片离子筛选的N-连接糖的二级质谱的匹配进行随机匹配概率打分,最后将符合预先设定的完整N-糖肽谱图匹配条件的归结为靶向GPSMs; S8、在诱饵库中按照S3-S7的步骤,获得诱饵GPSMs; S9、将靶向GPSMs和诱饵GPSMs组合,并按Pscore从小到大排序,选取一个阈值Pscore,使得假阳性不大于1%,对阈值Pscore以下的靶向GPSMs去重,获得完整N-糖肽IDs。
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