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龙图腾网获悉上海思路迪生物医学科技有限公司申请的专利一种RT-qPCR定量的内参及其制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117448449B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210878275.X，技术领域涉及：C12Q1/6886；该发明授权一种RT-qPCR定量的内参及其制备方法和应用是由陈升;张大东;许晓雅;李志宽;年宝宁设计研发完成，并于2022-07-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种RT-qPCR定量的内参及其制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明提出了一种RT‑qPCR定量的内参及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述内参选自miR‑423‑3p、miR‑128‑3p、miR‑30d‑5p、miR‑339‑3p、miR‑625‑3p、miR‑140‑3p、let‑7g‑5p、miR‑148b‑3p、miR‑191‑5p和miR‑24‑3p中的至少一种。本发明采用smallRNAsequencing技术对胰腺炎和胰腺癌患者血浆小胞外囊泡miRNA表达进行定量，筛选不同个体之间的表达最为稳定的miRNA作为候选内参；采用smallRNAsequencing技术在另一独立的胰腺炎和胰腺癌患者群体对筛选出的候选内参进行稳定性验证。

本发明授权一种RT-qPCR定量的内参及其制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种RT-qPCR定量的内参的制备方法，其特征在于，该RT-qPCR定量的内参用于在慢性胰腺炎和胰腺癌的RT-qPCR定量中的应用；该方法包括以下步骤： S1.血浆小胞外囊泡的提取；其中，所述血浆小胞外囊泡的来源样本是慢性胰腺炎和胰腺癌患者的血浆样本； S2.血浆小胞外囊泡miRNA的抽提及表达检测； S3.对抽提得到的miRNA依次进行测序比对、注释、过滤、表达量标准化处理，得到标准化后的miRNA的表达量； S4：依据筛选标准对miRNA进行筛选，筛选出稳定的miRNA，作为待验证的候选内参；其中，所述筛选标准为： 在慢性胰腺炎和胰腺癌患者中表达水平都较高，标准化后表达量大于8； 2）变异系数小且表达稳定； S5.对待验证的候选内参进行稳定性验证，择优确定最终内参； 其中，所述待验证的候选内参包括miR-423-3p、miR-128-3p、miR-30d-5p、miR-339-3p、miR-625-3p、miR-140-3p、let-7g-5p、miR-148b-3p、miR-191-5p和miR-24-3p； 所述最终内参为miR-423-3p，所述miR-423-3p的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示； 其中，步骤S4具体包括： S41：剔除标准化后表达量小于8的miRNA； S42：计算剩余的每个miRNA的变异系数，并将变异系数按照从小到大进行排序； S43：选取变异系数排序处于前N个的miRNA，将选取的miRNA的表达量进行稳定性分析； S44：选取综合稳定性靠前的前M个miRNA作为待验证的候选内参； 其中，所述N与M为自然数，且N大于M。

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