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中国人民解放军海军军医大学第三附属医院王红阳获国家专利权

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龙图腾网获悉中国人民解放军海军军医大学第三附属医院申请的专利血液样本中GPC-3复合物的富集、检测方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114813266B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210251108.2,技术领域涉及:G01N1/28;该发明授权血液样本中GPC-3复合物的富集、检测方法及应用是由王红阳;文文;陈淑桢;辛鑫设计研发完成,并于2022-03-15向国家知识产权局提交的专利申请。

血液样本中GPC-3复合物的富集、检测方法及应用在说明书摘要公布了:本发明提供了血液样本中GPC‑3复合物的富集、检测方法及应用。富集方法包括A、采集肝癌患者外周血置于抗凝管中并混匀全血;B、加入多倍体积的红细胞裂解液,吹打混匀,冰上裂解后,离心弃红色上清,若细胞沉淀仍有红色,重复该步骤;C、洗涤沉淀1‑2次,加入PBS或生理盐水重悬沉淀,离心弃上清;D、白细胞计数,加PBS重悬细胞沉淀,取适量充池,静置2‑3分钟,通过低倍镜四角4个大方格手工白细胞计数,计算公式如下:WBCL=N4*105*104,并计算每毫升原悬液中的白细胞数量,WBCml原悬液=N4*104*稀释倍数;E、获取的细胞加入含1%蛋白酶抑制剂和1%磷酸酶抑制剂的裂解液,冷藏静置一定时间后,离心获取上清液作为待检测样本,实现GPC‑3富集。

本发明授权血液样本中GPC-3复合物的富集、检测方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种血液样本中GPC-3复合物的富集方法,其特征在于,包含如下步骤: A、血样采集 采集肝癌患者外周血置于抗凝管中,并混匀全血; B、红细胞裂解 加入多倍体积的红细胞裂解液,吹打混匀,冰上裂解一定时间后,离心弃红色上清,若细胞沉淀仍有红色,重复该步骤; C、沉淀除杂 洗涤沉淀1-2次,加入PBS或生理盐水重悬沉淀,离心弃上清; D、白细胞计数 加PBS重悬细胞沉淀,取适量充池,静置2-3分钟,通过低倍镜四角4个大方格手工白细胞计数,计算公式如下:WBCL=N4*105*104,并计算每毫升原悬液中的白细胞数量, WBCml原悬液=N4*104*稀释倍数,当白细胞数量不低于107时,进入后续步骤; E、GPC-3复合物的富集 抗体纯化分离获取目的CTC细胞,对获取的细胞进行细胞计数并记录数据,获取的细胞加入含1%蛋白酶抑制剂和1%磷酸酶抑制剂的裂解液,所述裂解液包括RIPA裂解液或NP-40裂解液,所述RIPA裂解液的主要成分为:Tris盐缓冲体系内的TritonX-100和SDS;所述NP-40裂解液的主要成分为:Tris盐缓冲液体系下的NP-40和脱氧胆酸钠溶液;冷藏静置一定时间后,离心获取上清液作为待检测样本。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国人民解放军海军军医大学第三附属医院,其通讯地址为:200438 上海市杨浦区长海路225号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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