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龙图腾网获悉山东第一医科大学(山东省医学科学院)申请的专利一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器及其制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116577385B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310548412.8，技术领域涉及：G01N27/26；该发明授权一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器及其制备方法和应用是由焦瑾;程涛设计研发完成，并于2023-05-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器及其制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器及其制备方法和应用，首先，通过功能性磁珠上的生物素化适体与AβO和Tau之间的竞争性结合作用来释放DNA双足。然后，游离的DNA两足在双切刻酶的辅助下在电极表面上行走，并从电极表面释放AβO和Tau的底物，产生一对多的信号放大效应。DNA步行者作为制备生物传感器的元件被用于检测疾病相关生物标志物已得到广泛的探索和应用。本发明的传感器不仅可以同时灵敏检测AβO和Tau，而且以相互补充的方式使AD的诊断更加精准。

本发明授权一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器及其制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种双切刻酶驱动的双自由足DNA步行者生物传感器的制备方法，其特征在于包括如下步骤： 1将生物素化的AβO适配体T1与AβODNA步行者W1按摩尔比为1：1的比例混合，形成dsDNAT1W1， 将生物素化的Tau适配体T2与TauDNA步行者W2按摩尔比为1：1的比例混合，形成dsDNAT2W2， 链霉亲和素包被的磁珠Strep-MB与T1W1和T2W2结合形成具有识别和捕获功能的纳米颗粒；在AβO和Tau存在的情况下，由于适配体T生物素化的AβO适配体T1和生物素化的Tau适配体T2与AβO和Tau的竞争性结合，AβODNA步行者W1和TauDNA步行者W2在动力学竞争下被释放；所述的生物素化的AβO适配体T1的基因序列为SEQIDNo.1所示的核苷酸序列；所述的生物素化的Tau适配体T2的基因序列为SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；所述的AβODNA步行者W1的基因序列为SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；所述的TauDNA步行者W2的基因序列为SEQIDNo.4所示的核苷酸序列； 2AβODNA步行者W1和TauDNA步行者W2可以与金电极表面携带有亚甲基蓝MB的AβO锚定链A1和携带二茂铁FC的Tau锚定链A2杂交，形成含有Nt.A1WI和Nb.BbvCI切割位点的dsDNA，相应的位点位于锚定链A1和锚定链A2上；亚甲基蓝MB标签和FC标签通过切刻酶切割从金电极的表面移除，重新获得自由的双足DNA步行者继续在电极表面上移动，产生循环扩增效应，制得双切刻酶驱动的自由足DNA步行者生物传感器。

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