江南大学王小元获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116536233B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310404567.4,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌是由王小元;王震;赵爱珍;乔君;汪宸卉设计研发完成,并于2023-04-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌在说明书摘要公布了:本发明公开了一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌,属于基因工程和合成生物学领域。本发明敲除大肠杆菌MG1655中膜壁表层分子、磷脂和葡萄糖转运、磷酸乙醇胺修饰以及enoyl‑ACP还原酶相关的132个基因,表达类脂A修饰基因FnlpxE、SepagP和SepagL,构建了菌株MW021pTEPL。MW021pTEPL的生长性能大幅度提高且发酵过程中不再需要抗生物和诱导剂;在2‑L发酵罐体系中,MW021pTEPL生长的最高OD600能达到38.54,能生产13.84gL的干细胞和约88.99mgL的总lipidA;总lipidA中只含有两种结构,分别为MPL和D‑MPLA。
本发明授权一种能高效生产单磷酸类脂A疫苗佐剂的重组大肠杆菌在权利要求书中公布了:1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌敲除了大肠杆菌基因组上的菌毛基因簇、鞭毛基因簇、肠共同抗原基因簇、磷脂转运系统相关基因:mlaA、mlaC和pldA基因、葡萄糖转运相关基因:ptsG基因、磷酸乙醇胺修饰相关基因:eptA基因以及FabI三氯生系统中相关必需基因:fabI基因,并过表达了来自弗朗西斯菌基因组中的脱磷酸酶和沙门氏菌基因组中的十六酰基转移酶和脱酰基酶; 所述菌毛基因簇由12个操纵子共64个基因组成,分别为yagV,yagW,yagX,yagY,yagZ,gltF,yhcA,yhcD,yhcE,yhcF,fimA,fimI,fimC,fimD,fimF,fimG,fimH,sfmA,sfmC,sfmD,sfmH,sfmF,ycbQ,ycbR,ycbS,ycbT,ycbU,ycbV,ycbF,ydeQ,ydeR,ydeS,ydeT,yraH,yraI,yraJ,yraK,yadC,yadK,yadL,yadM,htrE,yadV,yadN,yehA,yehB,yehC,yehD,ybgO,ybgP,ybgQ,ybgD,yfcO,yfcP,yfcQ,yfcR,yfcS,yfcT,yfcU,yfcV,ygiL,yqiG,yqiH,yqiI,其序列的NCBI登录号依次为b0289,b0290,b0291,b0292,b0293,b3214,b3215,b3216,b4569,b3219,b4314,b4315,b4316,b4317,b4318,b4319,b4320,b0530,b0531,b0532,b0533,b0534,b0938,b0939,b0940,b0941,b0942,b0943,b0944,b1502,b1503,b1504,b1505,b3142,b3143,b3144,b3145,b0135,b0136,b0137,b0138,b0139,b0140,b0141,b2108,b2109,b2110,b2111,b0716,b0717,b0718,b0719,b2332,b2333,b2334,b2335,b2336,b2337,b2338,b2339,b3043,b3046,b3047,b3048; 所述鞭毛基因簇由4个操纵子共50个基因组成,分别为fliE,fliF,fliG,fliH,fliI,fliJ,fliK,fliL,fliM,fliN,fliO,fliP,fliQ,fliR,fliY,fliZ,fliA,fliC,fliD,fliS,fliT,flgN,flgM,flgA,flgB,flgC,flgD,flgE,flgF,flgG,flgH,flgI,flgJ,flgK,flgL,flhE,flhA,flhB,cheZ,cheY,cheB,cheR,tap,tar,cheW,cheA,motB,motA,flhC和flhD,其序列的NCBI登录号依次为946446,946448,946451,946456,946457,946454,946449,946443,946442,946423,946458,946462,946463,946464,948833,946833,948824,949101,946428,946429,946433,945634,946684,946300,945678,946687,945813,945636,945639,945647,946996,947534,947456,945648,945646,946094,946390,946391,946392,946393,946394,946396,946397,946399,946400,946401,946402,947564,947280和945442; 所述肠共同抗原基因簇由1个操纵子组成,所述rfe-rffM操纵子由rfe、wzzE、wecB、wecC、rffG、rffH、rffC、wecE、wzxE、wecF、wzyE、rffM共12个基因组成,其序列的NCBI上登录号依次为NP_418231.1、NP_418232.1、YP_026253.1、YP_026254.1、YP_026255.1、NP_418236.1、YP_026256.1、NP_418238.1、NP_418239.1、YP_026257.1、NP_418241.1、NP_418242.1; 所述磷酸转运系统相关基因:mlaA、mlaC和pldA,其序列的NCBI上登录号为NP_416848.1、NP_417659.1、NP_418265.1; 所述葡萄糖转运相关基因:ptsG基因、磷酸乙醇胺修饰相关基因:eptA基因以及FabI三氯生系统中相关必需基因:fabI基因,其序列的NCBI上登录号依次为NP_415619.1、NP_418538.2、NP_415804.1; 所述来自弗朗西斯菌lpxE基因的序列的NCBI登录号为WP_159184080.1;所述来自沙门氏菌pagP和pagL基因的序列的NCBI登录号分别为NP_459620.1、NP_416848.1。
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