合肥工业大学张华获国家专利权
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龙图腾网获悉合肥工业大学申请的专利一种促进番茄果实成熟的基因SlCAS1及其调控方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115466743B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211135305.4,技术领域涉及:C12N15/29;该发明授权一种促进番茄果实成熟的基因SlCAS1及其调控方法是由张华;孙忱;姚改芳;胡康棣;孙红叶;颜龙飞;肖钰薇设计研发完成,并于2022-09-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种促进番茄果实成熟的基因SlCAS1及其调控方法在说明书摘要公布了:一种促进番茄果实成熟的基因SlCAS1及其调控方法,所述基因的核苷酸序列如SeqNo.1所示。本发明通过从番茄中得到SlCAS1基因完整的编码序列,设计靶点,将靶点连接到载体CRIPSR‑Cas9上,利用农杆菌侵染法转化植物,获得基因编辑植株,对基因编辑植株进行了分析。
本发明授权一种促进番茄果实成熟的基因SlCAS1及其调控方法在权利要求书中公布了:1.一种促进番茄果实成熟的调控方法,其特征在于:包括下列步骤: 步骤1:以番茄cDNA为模板,以第一轮正向引物-F1、第一轮反向引物-R1为引物对进行第一轮PCR扩增,获得第一轮PCR扩增产物;再以第一轮PCR扩增产物为模板,以第二轮正向引物-F2、第二轮反向引物-R2为引物对进行第二轮PCR扩增,并使用普通DNA纯化试剂盒进行纯化回收获得第二轮PCR扩增产物,即为目的基因片段;其中,引物序列如下: 第一轮正向引物-F1:5’-AGAGATAGACATTTACAGGCTTCA-3’; 第一轮反向引物-R1:5’-TTGAACACTAATCAACTGATACAGG-3’; 第二轮正向引物-F2:5’-CGCGGATCCATAAATTTCATCAATGGCGTCGTTG-3’; 第二轮反向引物-R2:5’-CCGCTCGAGATCAACTGATACAGGTTGCATGTTT-3’; 步骤2:用限制性内切酶BamHI和限制性内切酶XhoI分别对载体pBI121和目的基因片段进行双酶切,酶切产物纯化后,得到线性pBI121载体和酶切后目的基因片段; 步骤3:酶切后目的基因片段和线性pBI121载体进行重组,得到CAS1-pBI121质粒; 步骤4:将CAS1-pBI121质粒转化EHA105农杆菌感受态细胞; 步骤5:含有CAS1-pBI121质粒的EHA105农杆菌侵染番茄子叶并获得转基因阳性苗SlCAS1-OE。
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