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龙图腾网获悉中山大学孙逸仙纪念医院申请的专利一种高通量人肾脏类器官诱导分化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115466728B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210969848.X，技术领域涉及：C12N5/10；该发明授权一种高通量人肾脏类器官诱导分化方法是由周一鸣;杨小强;汪乐设计研发完成，并于2022-08-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高通量人肾脏类器官诱导分化方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种高通量人肾脏类器官诱导分化方法，包括：向人诱导多能干细胞中加入ROCK通路抑制剂处理18～24h；更换为GSK‑3抑制剂处理1～4天；更换为含有GSK‑3抑制剂、FGF‑9和Heparin的培养基B处理1～3天；进行高通量3D培养，高效得到大量类器官球体；使用GSK‑3抑制剂处理后，使用含有FGF‑9和Heparin的培养基B培养1～6天；更换为无添加的培养基B培养1～10天，得到成熟的肾脏类器官。该方法操作简单，针对性强，提高了诱导分化的效率和分化稳定性，降低了分化成熟所需时间，增加了肾脏类器官的增殖效率，解决了常规方法中分化效率参差不齐，操作冗杂的问题。

本发明授权一种高通量人肾脏类器官诱导分化方法在权利要求书中公布了：1.一种人肾脏类器官诱导分化方法，其特征在于，包括如下步骤： 1向人诱导多能干细胞中加入含有ROCK通路抑制剂的培养基A处理18～24h；所述培养基A为mTeSR1培养基； 2更换为含有GSK-3抑制剂的培养基B处理1～4天； 3更换为含有GSK-3抑制剂、FGF-9和Heparin的培养基B处理1～3天；所述培养基B为STEMdiffAPEL2培养基； 4消化细胞得到细胞悬液，进行3D培养，得到类器官球体； 5使用含有GSK-3抑制剂的培养基B处理50～70min，转移至培养器中使用含有FGF-9和Heparin的培养基B培养1～6天； 6更换为无添加的培养基B培养1～10天，得到成熟的肾脏类器官； 所述ROCK通路抑制剂为Y-27632； 所述GSK-3抑制剂为CHIR99021； 1中细胞的接种量为0.6×105细胞9～10cm2； 1中所述人诱导多能干细胞为人尿源诱导多能干细胞； 4中所述3D培养的步骤为：使用v型96孔培养板对细胞进行培养，并辅助机械刺激； 所述机械刺激的强度为50～150rpm，机械刺激的时间为20～50h； 5中所述培养器提前使用基质胶包被；包被时间为25～35min，包被温度为35～37℃。

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