温州医科大学方合志获国家专利权
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龙图腾网获悉温州医科大学申请的专利一种基于邻位连接技术和杂交链式反应检测线粒体呼吸链超级复合体的探针组合及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120272591B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510773145.3,技术领域涉及:C12Q1/6883;该发明授权一种基于邻位连接技术和杂交链式反应检测线粒体呼吸链超级复合体的探针组合及应用是由方合志;钟声;沈丽君;王娅设计研发完成,并于2025-06-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于邻位连接技术和杂交链式反应检测线粒体呼吸链超级复合体的探针组合及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于邻位连接技术和杂交链式反应检测线粒体呼吸链超级复合体的探针组合及应用,属于探针检测领域。通过确定两个能够反映超复合体结构完整性的临近蛋白亚基作为基座,利用抗原抗体结合的原理,促使识别并结合基座的抗原抗体因为核酸标记引发邻位连接反应(PLA),根据杂交链式反应(HCR)原理,实现检测信号的级联放大,并通过超复合体结构完整性判定氧化磷酸化系统活性,克服传统检测方法的不足和局限,实现对超复合体结构快捷、高灵敏的准确检测。同时,还通过将细胞固定在96孔荧光板上,利用多功能酶标仪对线粒体超复合体结构完整性进行检测,最终实现同时对多达96个样本进行平行检测,实现检测的数字化和高通量。
本发明授权一种基于邻位连接技术和杂交链式反应检测线粒体呼吸链超级复合体的探针组合及应用在权利要求书中公布了:1.一种基于邻位连接技术检测线粒体呼吸链超级复合体的PLA探针,其特征在于,所述线粒体呼吸链超级复合体为线粒体呼吸链超级复合体CI1CIII2CIV1;所述PLA探针包括邻位探针和检测探针,其中所述邻位探针包括抗体核酸偶联物I和抗体核酸偶联物II,所述抗体核酸偶联物I为核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的DNA1探针和线粒体呼吸链超级复合体抗体偶联得到,所述抗体核酸偶联物II为核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的DNA2探针和线粒体呼吸链超级复合体抗体偶联得到; 所述检测探针包括核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的DNA3探针和SEQIDNO.4所示的DNA4探针; 所述DNA3探针和DNA4探针中的一条探针带有荧光基团,另一条探针带有猝灭基团; 与所述DNA1探针偶联的线粒体呼吸链超级复合体抗体为线粒体复合体I亚基NDUFB8抗体;与所述DNA2探针偶联的线粒体呼吸链超级复合体抗体为复合体IV亚基MT-CO1抗体。
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