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龙图腾网获悉昆明理工大学申请的专利一种纳米酶凝胶比色-荧光双模式检测细菌内毒素的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119269427B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411754991.2，技术领域涉及：G01N21/31；该发明授权一种纳米酶凝胶比色-荧光双模式检测细菌内毒素的方法是由向诚;杨德志;杨亚玲;李秋兰设计研发完成，并于2024-12-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种纳米酶凝胶比色-荧光双模式检测细菌内毒素的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种纳米酶凝胶比色‑荧光双模式检测细菌内毒素的方法，本发明中以合成的铁、铜掺杂碳点纳米材料CS@Fe,CuCDs为还原剂还原KMnO4形成CS@Fe,CuCDs‑MnO2纳米酶，CS@Fe,CuCDs‑MnO2表现出独特的荧光及类过氧化物酶特性，荧光量子产率达76%；然后将CS@Fe,CuCDs‑MnO2纳米酶与琼脂糖溶液、3,3’‑二氨基联苯胺四盐酸盐溶液混合，滴加到细胞培养孔板中，冷却制得纳米酶水凝胶微孔板；将纳米酶水凝胶微孔板应用在比色‑荧光双模式检测细菌内毒素中，构建了一种纳米酶凝胶基荧光和比色双模式生物传感器；本发明方法具有灵敏度高、特异性强、操作简单、快速等特点。

本发明授权一种纳米酶凝胶比色-荧光双模式检测细菌内毒素的方法在权利要求书中公布了：1.一种纳米酶凝胶比色-荧光双模式检测细菌内毒素的方法，其特征在于，步骤如下： （1）将0.3-0.5g壳聚糖、0.3-0.5g柠檬酸、0.15-0.35gCuCl2·2H2O、0.18-0.4gFeCl3·6H2O、0.15-0.35g邻苯二胺溶解于30-50mL体积浓度0.05-0.1%的醋酸溶液中，超声处理后，将混合液置于微波、170-190℃下反应1-2h后，自然冷却至室温，用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，再经高速离心，收集上清液，真空干燥制得铁、铜掺杂碳点纳米材料CS@Fe,CuCDs； （2）将高锰酸钾溶解于CS@Fe,CuCDs溶液中，室温搅拌混匀后，高速离心，收集上清液，真空干燥制得CS@Fe,CuCDs-MnO2纳米酶； （3）将琼脂糖溶于去离子水20mL中，加热至完全溶解后，加入CS@Fe,CuCDs-MnO2纳米酶溶液100-500μL和3,3’-二氨基联苯胺四盐酸盐溶液100-500μL，混匀后，将混合液快速滴加到细胞培养孔板中，冷却至室温，制得纳米酶水凝胶微孔板； （4）将不同浓度的细菌内毒素和H2O2滴入纳米酶水凝胶微孔板中，在30℃下孵育10-15min后，在自然光或荧光条件下拍照采集图片，利用图像处理软件读取拍摄图像的RGB值，将其转化为灰度值，确定灰度值与细菌内毒素浓度的线性关系； （5）将待测样品和H2O2滴入纳米酶水凝胶微孔板中，在30℃下孵育10-15min后，在自然光或荧光条件下拍照采集图片，利用图像处理软件读取拍摄图像的RGB值，根据RGB值获得待测样品中细菌内毒素含量。

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