宁波大学陈乐获国家专利权
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龙图腾网获悉宁波大学申请的专利基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116626282B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310413422.0,技术领域涉及:G01N33/531;该发明授权基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法是由陈乐;郭智勇;张冬雨;杨帆;郝婷婷;邬杨波;谢建军设计研发完成,并于2023-04-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法,特点是包括以下步骤:1将食源性致病菌适配体结合到HMSMs@SAA表面后得到信号单元HMSMs@SAAApt;2将炔基、叠氮基偶联到PEG、PAA上得到凝胶前驱体Azide‑PEG‑Azide、PAA‑Alkyne;3将PAA‑Alkyne溶液、Azide‑PEG‑Azide溶液、HMSMs@SAAApt分散液、CuSO4溶液按照体积比10:10:1:1混合即得LF‑NMR测试液,再与食源性致病菌样品混合测定未知样品中食源性致病菌浓度;优点是灵敏度和精确性高、特异性强且操作简单快速。
本发明授权基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于Cu+介导点击化学凝胶体系的低场核磁共振均相免疫检测食源性致病菌的方法,本方法不以诊断或治疗为目的,其特征在于包括以下步骤: 1信号单元HMSMs@SAAApt的合成 A.向氨基化介孔中空二氧化硅小球HMSMs中负载抗坏血酸钠SAA,得到HMSMs@SAA; B.将食源性致病菌适配体Apt通过静电引力作用结合到HMSMs@SAA表面后封住所有介孔,得到信号单元HMSMs@SAAApt; 2低场核磁共振LF-NMR测试液的制备 A.将80~120mg1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐EDC、10~20mgN-羟基琥珀酰亚胺NHS、250~300mg双羧基聚乙二醇HOOC-PEG-COOH溶解在10mL水中,调节pH=5.0,室温搅拌30min,加入0.5~1mL0.5molL3-叠氮基丙胺溶液,偶联反应3h,反应结束后将产物转移到截留分子量为1000Da的透析膜中透析12h,冷冻干燥,得到叠氮基修饰的聚乙二醇Azide-PEG-Azide粉末; B.将500~550mgEDC、300~350mgNHS、0.5~1g35wt%聚丙烯酸PAA溶解在10mL水中,调节pH=5.0,室温搅拌30min,加入100~200mg炔丙胺,偶联反应3h,将产物用截留分子量为1000Da的透析膜透析12h,得到炔丙胺修饰的聚丙烯酸PAA-Alkyne溶液; C.将2wt%PAA-Alkyne溶液、1.4×10-2molLAzide-PEG-Azide溶液、0.5mgmLHMSMs@SAAApt分散液、1.0×10-4molLCuSO4溶液按照体积比10:10:1:1混合,即得LF-NMR测试液; 3低场核磁共振均相免疫检测 将1.0mLLF-NMR测试液、100μL食源性致病菌样品溶液加入到样品瓶中,反应15min后,使用CPMG脉冲序列测量法测定一系列不同浓度的食源性致病菌对应的水质子的横向驰豫时间差值ΔT2的大小,建立水质子的横向驰豫时间差值与食源性致病菌浓度之间的定量关系,根据该定量关系即可测定未知样品中食源性致病菌浓度,ΔT2的值由以下公式计算:ΔT2=T2negative–T2positive,其中T2为水质子的横向驰豫时间,T2negative是无食源性致病菌时的平均T2,T2positive是有食源性致病菌时的平均T2。
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