三峡大学吕亚丰获国家专利权
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龙图腾网获悉三峡大学申请的专利一种靶向感染乳腺癌细胞的AAV载体及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115044615B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210461802.7,技术领域涉及:C12N15/864;该发明授权一种靶向感染乳腺癌细胞的AAV载体及应用是由吕亚丰;曹春雨;张浩;黄文峰;黄晓飞;吴红艳设计研发完成,并于2022-04-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种靶向感染乳腺癌细胞的AAV载体及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了靶向乳腺癌细胞的嵌合AAV2衣壳、靶向感染乳腺癌细胞的AAV2载体构建方法、使用所述载体靶向乳腺癌细胞的方法以及携带自杀基因治疗乳腺癌的方法。本发明通过基因工程技术将EC1蛋白插入到AAV2衣壳表面以及突变VP1蛋白R585、R588位点,获得一种AAV病毒载体(AAV2M‑EC1),与野生型AAV2相比,AAV2M‑EC1具有靶向乳腺癌细胞的特性,且大大减少对肝脏、肌肉组织的感染能力。以AAV2M‑EC1为载体,携带自杀基因HSV‑TK,尾静脉注射移植瘤小鼠后,可显著抑制小鼠乳腺癌细胞的增殖。
本发明授权一种靶向感染乳腺癌细胞的AAV载体及应用在权利要求书中公布了:1.一种AAV病毒载体的包装方法,其特征在于,具体包括以下步骤: (1)以AAV2衣壳质粒pRC为模板,通过突变VP1蛋白T138位点为A获得表达VP1及VP3的pRVP13质粒,衣壳VP13DNA序列为SEQIDNO:1; 质粒RVP13为PCR模板,将衣壳蛋白VP1第585位点精氨酸突变为丙氨酸,第588位点的精氨酸突变为丙氨酸,获得pRVP13M质粒,衣壳VP13MDNA序列为SEQIDNO:3; (2)以AAV2衣壳质粒pRC为模板,通过对pRC质粒的VP2蛋白M1和M203位点进行定点突变为丙氨酸,获得质粒pVP2,该质粒提供衣壳蛋白VP2,其DNA序列为SEQIDNO:2;在pVP2质粒基础上,将EC1蛋白序列插入VP2蛋白氨基端,获得pVP2-EC1质粒,VP2-EC1DNA序列为SEQIDNO:4; (3)将步骤(1)得到的质粒pRVP13M,步骤(2)得到的质粒pVP2-EC1,pHelper,pAAV组合,构建AAV四质粒包装系统; (4)将步骤(3)得到的包装系统,包装AAV病毒。
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