重庆医科大学王建为获国家专利权
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龙图腾网获悉重庆医科大学申请的专利特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备及应用方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115901895B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211460426.6,技术领域涉及:G01N27/327;该发明授权特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备及应用方法是由王建为;张秀珍;李露;彭奇龄;蒋宁设计研发完成,并于2022-11-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备及应用方法在说明书摘要公布了:本发明涉及医药技术领域,该发明是特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备方法,包括以下步骤:a、SiO2纳米球的合成;b、采用a步骤中合成得到的SiO2纳米球合成得到SiO2@QD;c、采用b步骤中合成得到的SiO2@QD制备得到SiO2@QD‑Ab;d、采用步骤c中合成得到的SiO2@QD‑Ab构建免疫电化学平台。本发明还公开了一种特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的应用方法。本发明具有高灵敏度、高特异性、低成本、检测速度快的特点。
本发明授权特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备及应用方法在权利要求书中公布了:1.一种特异性检测胆囊癌CTCs超灵敏电化学免疫传感器的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:a、SiO2纳米球的合成;b、采用a步骤中合成得到的SiO2纳米球合成得到SiO2@QD;c、采用b步骤中合成得到的SiO2@QD制备得到SiO2@QD-Ab;d、采用步骤c中合成得到的SiO2@QD-Ab构建免疫电化学平台; 步骤d中,首先将金电极用0.3mm和0.05mm的氧化铝粉抛光打磨成光滑镜面状,随后在超纯水,乙醇,超纯水中分别超声处理5min,再用新鲜配制的食人鱼溶液活化15min,然后分别在超纯水,乙醇,超纯水中超声5min;室温干燥,备用;将10µL200nMSH-EpCAM适配体滴在金电极上,4℃孵育过夜;取出捕获电极,用0.01mMpH7.4PBS清洗未结合适配体,自然干燥后,滴加5µL0.1MMCH防止非特异性吸附;0.01mMpH7.4PBS清洗,待自然干燥后,NOZ细胞37℃孵育60min;清洗未结合细胞,加入5µL获取得到的SiO2@QD-Ab,孵育120min;清洗未结合材料,加入30µLHNO3消化10min,将消化液转移至3mL乙酸-醋酸溶液中; 在步骤c中,取2mL步骤b中合成得到的SiO2@QD,5500rpm离心10min,重悬于1mL0.1M的MES中,加入100µLEDC和20µLNHS,涡旋混匀,超声15min,将得到的溶液以5500rpm离心10min,弃上清,重悬于200µL0.05%PBST中,加入30µLanti-ENPP1抗体,置于振荡器上室温孵育2h;加入100µL5%BSA,室温振荡孵育1h,4500rpm,时间为10min,弃上清,0.05%PBST清洗一次,最后重悬于0.2mL0.05%PBST中并合成得到SiO2@QD-Ab。
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