上海市农业科学院何大乾获国家专利权
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龙图腾网获悉上海市农业科学院申请的专利鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒及建库方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117165659B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311179512.4,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒及建库方法和应用是由何大乾;杨云周;王惠影;李光全;王贤泽;刘毅;王翠设计研发完成,并于2023-09-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒及建库方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒及建库方法和应用,试剂盒包括试剂盒A、试剂盒B和试剂盒C和磁珠,本发明使用两种常规内切酶控制目标片段位置和数量,使用改进的富集引物使得GBS测序的文库混合数量显著增加,充分发挥NGS数据量大的优势,使鹅群体遗传学研究更为可行。理论上,这一建库策略只需要更改相应的接头和index序列就可以使得最终待测个体数成倍增加。
本发明授权鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒及建库方法和应用在权利要求书中公布了:1.鹅双酶切简化基因组测序建库试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括: 试剂盒A:包括:浓度为1000UmL内切酶EcoRI、浓度为1000UmL内切酶CviAII、10×Buffer和ddH2O; 试剂盒B:包括:浓度为400000UmLT4连接酶、10×Buffer、浓度为20pmμLBA接头、浓度为20pmμLCA接头和ddH2O; 所述BA接头为SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示序列退火形成的双链DNA,其中,SEQIDNo.2经过5’磷酸化修饰,SEQIDNo.1和SEQIDNo.2中的m和n表示长度为5-20bp的任意短核苷酸条形码序列,n前端的4个碱基AATT是EcoRI的粘末端; 所述CA接头为SEQIDNo.3和SEQIDNo.4所示序列退火形成的双链DNA,其中,SEQIDNo.3经过5’磷酸化修饰; 试剂盒C:包括:浓度为2UμL高保真PCR聚合酶Mix、浓度为10pmμL富集引物和ddH2O; 所述富集引物F如SEQIDNo.5所示、R如SEQIDNo.6所示,其中,SEQIDNo.5中的h代表上游引物中的index序列,SEQIDNo.6中的y代表下游引物中的index序列。
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