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杭州度安医学检验实验室有限公司高飞获国家专利权

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龙图腾网获悉杭州度安医学检验实验室有限公司申请的专利一种血液中胰岛素样生长因子检测样本的处理及检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116754678B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310730020.3,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种血液中胰岛素样生长因子检测样本的处理及检测方法是由高飞;王婷婷;杜逍遥;高磊;张志栋设计研发完成,并于2023-06-19向国家知识产权局提交的专利申请。

一种血液中胰岛素样生长因子检测样本的处理及检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种血液中胰岛素样生长因子检测样本的处理及检测方法,样本处理采用0.6%SDS解离剂和沉淀剂对样本进行处理,并采用冰乙腈进一步清洗沉淀以清除SDS,减少SDS对仪器的损伤,采用确定好的色谱和质谱条件进行检测,利用标准曲线得出血液样本中胰岛素样生长因子的含量。本发明方法不需要经过SPE纯化,质谱检测仅需4.5min,对于大样本量的应用场景,极大地节约成本和检测时长。

本发明授权一种血液中胰岛素样生长因子检测样本的处理及检测方法在权利要求书中公布了:1.一种基于HPLC-MSMS的血液中胰岛素样生长因子的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:用IGF-1标准品和空白基质配制设计浓度梯度的标准曲线工作液,利用HPLC-MSMS对标准曲线工作液进行检测,采用外标定量法,以标准曲线工作液的浓度为X轴,以标准曲线工作液的色谱峰面积为Y轴,建立标准工作曲线;将检测样本注入HPLC-MSMS进行测定,检测得到的样本色谱峰面积,代入标准工作曲线,得到检测样本中IGF-1浓度; 所述检测样本的处理方法,包括以下步骤: S1、量取待测样本置于洁净的离心管a中,加入与待测样本等体积的0.6%SDS,充分混匀,将溶液离心至离心管底部,37℃孵育20-40min; S2、加入离心管a内溶液2倍体积的由乙酸、乙腈、丙酮混合组成的沉淀剂,充分混匀,蛋白沉淀1-3min,4℃离心; S3、吸取上清液置于洁净的离心管b中,加入上清液4.2倍体积的冷乙腈,充分混匀,放置于-20℃冰箱进行蛋白沉淀; S4、将蛋白沉淀的样本从-20℃冰箱取出4℃离心,去上清液;向沉淀中加入适量的冷乙腈,充分混匀,清洗沉淀和离心管管壁,4℃离心,去上清液,自然晾干; S5、加入0.1%甲酸水溶液,涡旋震荡,充分溶解即得检测样本; 所述沉淀剂按体积比乙酸:乙腈:丙酮=1:4:15混合; 所述检测的色谱条件如下: 色谱柱:PhenomenexKinetexC8柱,50x2.1mm,2.6μm,100A; 流动相:A:0.1%甲酸水溶液;B:0.1%甲酸乙腈溶液; 流速:0.4mLmin; 柱温:55℃; 进样量:15µL 采用梯度洗脱方式,梯度洗脱方式如下:流动相A的体积分数+流动相B的体积分数=100%;梯度洗脱时间4.5min停止,其中: 0.01-0.5min流动相A的体积分数为95%; 0.5-0.6min流动相A的体积分数由95%下降至80%; 0.6-2min流动相A的体积分数由80%下降至50%; 2-2.1min流动相A的体积分数由50%下降至0; 2.1-3.1min流动相A的体积分数保持在0; 3.1-3.2min流动相A的体积分数由0上升降至95%; 3.2-4.5min流动相A的体积分数保持在95%。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人杭州度安医学检验实验室有限公司,其通讯地址为:311121 浙江省杭州市余杭区五常街道向往街199号1幢2单元301、302、303、403室;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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