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江苏省农业科学院谭永安获国家专利权

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龙图腾网获悉江苏省农业科学院申请的专利一种绿盲蝽GRK基因、其dsRNA及其合成方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN113943720B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111296674.7,技术领域涉及:C12N9/12;该发明授权一种绿盲蝽GRK基因、其dsRNA及其合成方法和应用是由谭永安;肖留斌;乔恒;赵静;姜义平;张杰钰设计研发完成,并于2021-11-03向国家知识产权局提交的专利申请。

一种绿盲蝽GRK基因、其dsRNA及其合成方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种绿盲蝽G蛋白偶联受体激酶,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。本发明还公开了编码所述的绿盲蝽G蛋白偶联受体激酶的基因及其获取方法和应用。本发明还公开了绿盲蝽GRK基因的dsRNA及其应用。本发明合成的GRK基因的dsRNA对绿盲蝽有显著的致死效果,有效控制绿盲蝽的种群数量,为害虫防治提供了新的途径。同时,利用大肠杆菌合成dsRNA,可以在短时间大规模的合成产物,改变了试剂盒不能大量合成dsRNA的缺点。同时该发明成本低廉,适用范围广泛,操作简单,可以重复使用,不受限制。

本发明授权一种绿盲蝽GRK基因、其dsRNA及其合成方法和应用在权利要求书中公布了:1.绿盲蝽GRK基因的dsRNA在防治绿盲蝽中的应用,所述绿盲蝽GRK基因的dsRNA,其核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,所述应用是通过显微注射仪将dsRNA注射进绿盲蝽体内抑制绿盲蝽GRK基因的表达,所述注射剂量为500ng,所述dsRNA的高效合成方法步骤如下: 1)PCR扩增目的基因片段:在绿盲蝽GRK基因的dsRNA核苷酸序列的两端加上与L4440载体的同源序列,设计并合成上游引物如SEQIDNO.6所示和下游引物如SEQIDNO.7所示,以GRK基因的cDNA序列为模板,进行PCR扩增,获得PCR产物,纯化PCR产物得到目的基因片段; 2)重组菌株的构建:用同源重组酶连接步骤1)纯化后的目的基因片段与线性化L4440载体得到重组载体并进行表达得到重组菌株,所述L4440载体序列为SEQIDNO.10所示; 3)诱导表达:将步骤2)得到的重组菌株诱导表达得到菌体; 4)dsRNA的提取和纯化:提取菌体的总RNA,加入RNaseA和DNaesⅠ去除单链RNA和基因组DNA,得到PCR产物;加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇溶液,振荡,离心取上清;加入乙醇,充分混匀,静置,离心弃上清;用乙醇洗涤,离心收集沉淀;干燥后,用无核酸酶水溶解,获得纯化后的dsRNA。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江苏省农业科学院,其通讯地址为:210014 江苏省南京市玄武区钟灵街50号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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