华中农业大学郑雄杰获国家专利权
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龙图腾网获悉华中农业大学申请的专利从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119613309B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411615956.2,技术领域涉及:C07C403/02;该发明授权从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法是由郑雄杰;邓秀新;何政辰;叶俊丽;柴利军;谢宗周设计研发完成,并于2024-11-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法在说明书摘要公布了:本发明属于天然产物提取技术领域,具体涉及一种从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法。该方法至少包括以下步骤:S1:从山金柑的果皮中获得总类胡萝卜素粗提物;S2:用半制备UHPLC,以100%甲醇作为流动相A,100%MTBE作为流动相B,从上述总类胡萝卜素粗提物中将Rubixanthin分离纯化。通过本发明,可从山金柑果皮分离、鉴定和提纯Rubixanthin,获得较高纯度的该物质。
本发明授权从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法在权利要求书中公布了:1.一种从短童期野生柑橘类的山金柑的果皮中分离纯化Rubixanthin的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1:从山金柑的果皮中获得总类胡萝卜素粗提物; S2:用半制备UHPLC,以100%甲醇作为流动相A,100%MTBE作为流动相B,将Rubixanthin从总类胡萝卜素粗提物中纯化; 步骤S1中,所述山金柑为12月份冬至时期完全成熟的红色山金柑果实; 步骤S1包括以下步骤: S11:将山金柑的果皮用液氮速冻,然后冷冻干燥并磨碎,得到果皮研磨粉; S12:用色素提取剂从所述果皮研磨粉中获得总类胡萝卜素粗提物,所述色素提取剂为体积比为2:0.9~1.1:0.9~1.1的正己烷:丙酮:无水乙醇的混合溶液,混合溶液中加入有质量分数为0.09~0.11‰的二丁基羟基甲苯; 步骤S11中,所述果皮研磨粉通过冻干后磨碎得到,或通过液氮速冻后磨碎得到; 步骤S12具体包括以下步骤: S121:用所述色素提取剂于4-25℃浸提所述果皮研磨粉,得到色素浸提液; S122:用饱和氯化钠溶液将所述色素浸提液洗涤至中性,弃掉水相,保留上层有机相,蒸发所述色素浸提液的有机相中的溶剂,得到类胡萝卜素粗提物; S123:对所述类胡萝卜素粗提物再溶解,并进行皂化反应,将酯化形式的类胡萝卜素转化为自由态形式; S124:从步骤S123得到的皂化反应产物中去除水相,保留有机相,将所述皂化反应的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤至中性,去除水相,蒸发溶剂后,得到所述自由态的类胡萝卜素粗提物; 步骤S2中,通过如下的半制备高效液相色谱UHPLC法进行Rubixanthin的大量分离纯化: 色谱柱:YMCC30半制备色谱柱; 流动相A:100%甲醇; 流动相B:100%MTBE; 流速为:2mlmin; 洗脱条件:0-8min60%A;8-28min60-40%A;28-30min40%A保持2min;30-32min40-60%A;32-37min60%A保持5min; 可见光紫外吸收的channels:UV-vis-1:450nm或UV-vis-2:490nm; 收集17.3-17.9min出的洗脱峰,即得到纯化的Rubixanthin; 步骤S2中,将类胡萝卜素粗提物的干燥物溶于100%的乙酸乙酯中,室温离心,上清液过0.22μm滤膜,然后进行分离纯化。
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