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龙图腾网获悉吉林省中医药科学院(吉林省中医药科学院第一临床医院)申请的专利一种清热化毒丸HPLC指纹图谱的构建方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116773692B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310596131.X，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种清热化毒丸HPLC指纹图谱的构建方法及应用是由南敏伦;杨振;林艳玲;房云鹏;赵宏宇;赵昱玮;赫玉芳;李锦锦;龚本义;张瀚水设计研发完成，并于2023-05-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种清热化毒丸HPLC指纹图谱的构建方法及应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种清热化毒丸的指纹图谱构建和检测方法，构建方法包括如下步骤：取对照品和清热化毒丸样品，分别制备对照品溶液和供试品溶液；采用高效液相色谱法对对照品溶液和供试品溶液进行检测，获得相应对照品图谱和样品图谱；将样品图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析，获得具有标识性的清热化毒丸的指纹图谱，共获得29个共有峰，并且指认了其中的7个成分，并对29个共有峰进行了成分归属。本发明构建得到清热化毒丸的指纹图谱，色谱峰丰富，且包含归属于连翘、龙胆、黄芩、黄连、菊花、大黄、甘草、青黛等多味药材的有效成分，能够更全面地反应清热化毒丸的整体化学成分，为清热化毒丸的整体质量控制及评价提供了有效手段，克服了原质量控制方法的单一性和片面性，更好的监控和评价本品质量，指导规范化生产，具有较高的应用价值。

本发明授权一种清热化毒丸HPLC指纹图谱的构建方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种清热化毒丸HPLC指纹图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤： a.供试品溶液的制备：取清热化毒丸，剪碎，取0.5～2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25～100mL，称取重量，回流提取30～90分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； b.对照品溶液的制备：分别精密称取绿原酸、龙胆苦苷、甘草苷、连翘酯苷A、黄芩苷、盐酸小檗碱、黄芩素、汉黄芩素对照品适量，精密称定，以甲醇为溶剂，配制成质量浓度分别为0.006、0.02、0.02、0.04、0.04、0.01、0.01、0.005mgmL的混合对照品溶液，作为对照品溶液； c.测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μL，注入高效液相色谱仪，记录125分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得清热化毒丸的指纹图谱； 所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.02-0.3％甲酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5mLmin，柱温25-45℃，检测波长210～360nm；理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于5000； 梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0-10min，8％A；10-20min， 8～15％A；20-40min，15％A；40-55min，15～20％A；55-70min，20～25％A；70-80min，25％A；80-100min，25～45％A；100-110min，45～58％A；110-125min，58～70％A。

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