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龙图腾网获悉西安交通大学申请的专利一种固定化Twins Strep-Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱、制备方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116532101B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310392963.X，技术领域涉及：B01J20/281；该发明授权一种固定化Twins Strep-Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱、制备方法和应用是由龙建纲;苏武;时乐;孔宇设计研发完成，并于2023-04-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种固定化Twins Strep-Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱、制备方法和应用在说明书摘要公布了：本发明一种固定化TwinsStrep‑Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱、制备方法和应用，属于线粒体膜色谱柱制备技术领域。该方法首先将包含半胱氨酸的Strep‑Tactin蛋白键合到硅胶上，取线粒体膜上的TwinsStrep‑tag融合蛋白受体特异性结合上述包含半胱氨酸的Strep‑Tactin蛋白，形成稳定的亲和体系，使TwinsStrep‑tag融合蛋白固定在硅胶表面，得到线粒体膜色谱固定相，采用湿法装柱，制得固定化TwinsStrep‑Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱。本发明方法制备的线粒体膜色谱柱可靶向线粒体膜上特定蛋白，从复杂成分中高通量筛选与目标蛋白具有相互作用的小分子化合物。

本发明授权一种固定化Twins Strep-Tag融合蛋白的线粒体膜色谱柱、制备方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种固定化TwinsStrep-Tag融合蛋白的线粒体膜色谱固定相，其特征在于，所述线粒体膜色谱固定相是将包含半胱氨酸的Strep-Tactin蛋白键合到硅胶上，取线粒体膜上的TwinsStrep-tag融合蛋白受体特异性结合上述包含半胱氨酸的Strep-Tactin蛋白，形成稳定的亲和体系，使TwinsStrep-tag融合蛋白固定在硅胶表面，得到线粒体膜色谱固定相； 所述硅胶为氨基丙基硅胶；所述包含半胱氨酸的Strep-Tactin蛋白通过4-N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯进行化学反应键合到硅胶上； 线粒体膜色谱固定相的制备方法，包括以下步骤： （1）称取氨基丙基硅胶，并使其活化；称取4-二甲氨基吡啶和4-N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯溶解在干燥的N,N-二甲基甲酰胺溶液中，获得溶液； （2）将上述活化后的氨基丙基硅胶加入到上述溶液中，在室温避光下充分搅拌反应，离心后收集沉淀，清洗后干燥，制得4-N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯修饰的硅胶固定相； （3）称取含有半胱氨酸的Strep-Tactin用磷酸钾缓冲液清洗后，溶解在磷酸钾缓冲溶液中制备悬液，加入上述4-N-马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯修饰的硅胶固定相，避光搅拌，充分反应，制得包含半胱氨酸的Strep-Tactin修饰的硅胶固定相； （4）培养TwinsStrep-Tag融合蛋白高表达细胞系，当细胞计数不低于107个时，去除培养基，获得TwinsStrep-Tag融合蛋白细胞，分离出线粒体； （5）超声破碎上述线粒体，制备线粒体膜悬液，将线粒体膜悬液加入到上述步骤（3）得到的包含半胱氨酸的Strep-Tactin修饰的硅胶固定相中，均匀搅拌0.5~1h后，得到以包含半胱氨酸的Strep-Tactin修饰的硅胶为载体的线粒体膜固定相。

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