硅羿科技(上海)有限公司朱宝玉获国家专利权
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龙图腾网获悉硅羿科技(上海)有限公司申请的专利一种dsRNA标准品的纯化和制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120290548B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510781182.9,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种dsRNA标准品的纯化和制备方法是由朱宝玉;莫芹;邓廷山;徐铭;王奕翔设计研发完成,并于2025-06-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种dsRNA标准品的纯化和制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种dsRNA标准品的纯化和制备方法。本发明采用两步层析法制备的dsRNA标准品,在离子交换层析纯化步骤,本发明采用碱性氨基酸添加的方法,降低了长链dsRNA与层析填料的相互作用力,增加了盐溶液洗脱强度,提高了回收率,解决了dsRNA标准品制备当中纯化回收率低的问题。本发明提供的方法具有高效和低成本的特点,采用线性化的质粒作为体外转录模板的载体,可以实现大规模体外转录,一批次能够获得克级dsRNA产物,能够满足核酸农药领域登记和生产质量检测的标准品需求。
本发明授权一种dsRNA标准品的纯化和制备方法在权利要求书中公布了:1.一种dsRNA标准品的制备方法,其特征在于,所述方法包括体外转录模板制备,dsRNA粗溶液制备,dsRNA初纯液制备和dsRNA精纯液制备的过程; 所述dsRNA粗溶液制备过程中,包括向体外转录的反应液中加入DNase消化,加入蛋白酶消化和滤膜过滤的步骤; 所述dsRNA初纯液制备过程包括离子交换层析,所述离子交换层析包括柱平衡,上样和洗脱的步骤;所述离子交换层析为阴离子交换层析;所述上样步骤包括将dsRNA溶液用上样缓冲液稀释后上样至离子交换层析柱,所述上样缓冲液包括300~400mM精氨酸; 所述dsRNA精纯液制备过程中,包括将dsRNA初纯液进行第一次膜包换液,疏水层析纯化,再进行第二次膜包换液的步骤。
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