中国农业大学汪超子获国家专利权
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龙图腾网获悉中国农业大学申请的专利未包裹DNA污染物示踪剂及示踪方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119715296B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411782458.7,技术领域涉及:G01N15/08;该发明授权未包裹DNA污染物示踪剂及示踪方法是由汪超子;刘耿;刘家荣;霍再林;黄冠华;康绍忠;高鹏;胡曾杰;张煜涵;郭浩琦;徐沈涵;熊金灵设计研发完成,并于2024-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本未包裹DNA污染物示踪剂及示踪方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种未包裹DNA污染物示踪剂及示踪方法。所述示踪剂包括分:0.1‑20μmolL双链DNA,10‑50mmolLKBr或NaBr,0.05‑0.1molLTris,pH7.0‑9.0;双链DNA的结构为:侧翼序列1‑核心复制段‑侧翼序列2,其中,核心复制段的结构为:正向引物‑Linker1‑探针‑Linker2‑反向引物,且所述双链DNA与已知生物体的DNA不具有同源性。本发明将未包裹DNA示踪剂与污染物迁移转化模型相结合,具有在多孔介质中示踪不同吸附速率和分解速率的可溶性链状高分子污染物的优势,可实现多孔介质中污染物的多源示踪。
本发明授权未包裹DNA污染物示踪剂及示踪方法在权利要求书中公布了:1.多孔介质中污染物多源示踪方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将存在于多孔介质中的可溶性链状高分子确定为目标污染物; 2对目标污染物和核酸示踪剂进行短期柱试验,获得目标污染物和核酸示踪剂的穿透曲线; 其中,核酸示踪剂包括如下组分:0.1-20μmolL核酸分子、10-50mmolLKBr或NaBr,0.05-0.1molLTris,pH7.0-9.0;所述核酸分子含有n种不同的双链DNA,各双链DNA总长度不同、核心复制段的序列不同; 3对比目标污染物和核酸示踪剂的穿透曲线,筛选出穿透曲线与目标污染物最接近的双链DNA,记为DNA*,用其来模拟目标污染物的弥散和吸附特性; 4配制DNA*示踪剂:0.1-20μmolLDNA*,10-50mmolLKBr或NaBr,0.05-0.1molLTris,pH7.0-9.0; 5在多孔介质所存在的水体环境中,分别对目标污染物和DNA*示踪剂进行分解试验,实测得到目标污染物和DNA*的分解速率; 6在污染物迁移转化模型中,用Br的穿透曲线反解多孔介质的饱和导水率和对流弥散方程中的弥散系数; 7在污染物迁移转化模型中输入步骤5得到的DNA*示踪剂的分解速率; 8用步骤2中得到的DNA*示踪剂的穿透曲线来反解污染物迁移转化模型中的吸附、解吸附参数; 9将步骤6中的饱和导水率和弥散系数、步骤5中实测得到的目标污染物的分解速率和步骤8中反解得到的吸附、解吸附参数带入污染物迁移转化模型,得到模拟出的目标污染物的穿透曲线;然后与步骤2中通过柱试验获得的目标污染物的穿透曲线进行对比,参照公式1和2,当决定系数R2在0.8以上且纳什系数NSE在0.6以上,则表明所筛选的DNA*示踪剂和所建立的污染物迁移转化模型可用于示踪目标污染物在多孔介质中的迁移和分解过程; 其中,t是不同时间点,T是总时间;Yt是反解得到的参数计算出的目标污染物的穿透曲线中时间点t对应的浓度值;Xt是步骤2中通过柱试验获得的目标污染物的穿透曲线中时间点t对应的浓度值;是Xt的平均值; 所述双链DNA的结构为:侧翼序列1-核心复制段-侧翼序列2,总长度为82-120bp,且所述双链DNA与已知生物体的DNA不具有同源性; 其中,侧翼序列1、侧翼序列2的长度各自独立地为1-20bp,且侧翼序列1和侧翼序列2的长度之和为2-21bp; 核心复制段的结构为:正向引物-Linker1-探针-Linker2-反向引物;核心复制段的长度为80-100bp;其中正向引物、反向引物的长度各自独立地为18-25bp;探针段的长度为25-32bp;Linker1、Linker2的长度各自独立地为1-26bp,且Linker1和Linker2的长度之和为2-27bp; 核心复制段满足以下条件:1GC碱基含量为40%-60%;2探针中GC碱基含量为60%-65%;3引物中GC碱基含量为40%-60%;4探针的退火温度为68-70℃,引物的退火温度为55-62℃。
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