江南大学孙秀兰获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种特异性识别多西环素的核糖开关筛选和理性改造的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119438047B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411464165.4，技术领域涉及：G01N15/149；该发明授权一种特异性识别多西环素的核糖开关筛选和理性改造的方法是由孙秀兰;寇国成;周景文;孙嘉笛;高松;张银志设计研发完成，并于2024-10-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种特异性识别多西环素的核糖开关筛选和理性改造的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种特异性识别多西环素的核糖开关筛选方法及其理性改造和应用，属于基因表达调控领域。本发明提供了多西环素特异性核糖开关，并建立一种基于流式细胞仪的高通量筛选方法，同时借助计算机辅助预测核糖开关的结合位点，并计算突变位点，得到激活倍数进一步提高的多西环素核糖开关，通过剂量反应曲线测得该核糖开关在40‑100μgL呈现线性相关，同时构建的全细胞传感器价格低廉、稳定性强、操作简单，可用于现场快速检测。
本发明授权一种特异性识别多西环素的核糖开关筛选和理性改造的方法在权利要求书中公布了：1.一种特异性识别多西环素的核糖开关的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）通过多西环素的RNA适配体构建多西环素核糖开关文库； （2）通过SacB基因与EGFP基因融合构建核糖开关报告平台； （3）利用步骤（1）的多西环素核糖开关文库和步骤（2）的核糖开关报告平台构建质粒文库； （4）将步骤（3）的质粒文库转化至大肠杆菌中与底物共孵育；流式细胞仪收集高荧光细胞，即为阳性细胞； （5）将步骤（4）中的阳性细胞经过平板涂布培养，挑选白色无荧光单菌落，即为阳性菌落； （6）将步骤（5）中的阳性菌落经过孔板培养，在激发波长488nm，发射波长520nm下测定荧光强度，并使用分光光度计测定OD600，计算单位菌体荧光值，筛选出单位荧光值较大的菌体，即携带有特异性识别多西环素的核糖开关。
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