沧州市天津工业大学研究院张拥军获国家专利权
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龙图腾网获悉沧州市天津工业大学研究院申请的专利一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118955789B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411030051.9,技术领域涉及:C08F220/54;该发明授权一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及应用是由张拥军;王亚斐;张岩设计研发完成,并于2024-07-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及应用;以酶级联反应介导局部自由基聚合实现在高单体浓度条件下制备表面印迹聚合物。利用由固定在纳米载体表面的GOxHRP、乙酰丙酮和葡萄糖组成的引发体系启动局部自由基聚合反应,使聚合反应围绕纳米载体表面进行。避免了自由基在整个溶液中的随机游离,即使在高单体浓度下聚合也不会出现团聚现象。同时,该方法在高单体浓度条件下进行,有利于功能单体和模板蛋白的充分预组装,从而可以提高印迹效率。合成的纳米印迹微球对溶菌酶的印迹容量为145.3mgg‑1,印迹因子为14.2。
本发明授权一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法,其特征是,包括如下步骤: (1)将纳米粒子表面进行羧基化修饰:利用3-氨丙基三乙氧基硅烷在纳米粒子表面水解,洗涤后获得氨基化纳米粒子; (2)将氨基化纳米粒子分散在四氢呋喃溶液中,加入丁二酸酐,室温搅拌1-8h后洗涤获得表面羧基化的纳米粒子; (3)将洗涤后的羧基化纳米粒子分散在磷酸盐缓冲液中,按照1.5:1的摩尔比加入葡萄糖氧化酶(GOx)和辣根过氧化物酶(HRP),随后在1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺催化作用下使GOx和HRP共价偶联在纳米粒子表面; (4)用去离子水洗涤步骤(3)中的产物,获得固定化酶的纳米粒子分散液; (5)将模板蛋白、主单体、功能单体、交联剂加入pH5.0磷酸盐缓冲液,预组装10-60min,获得预组装液;主单体为N-异丙基丙烯酰胺,其浓度范围为0.05-1.00M; (6)向步骤(5)预组装液中加入固定化酶的纳米粒子分散液、乙酰丙酮和葡萄糖,引发聚合反应;在室温条件下聚合4-8h后停止反应,获得聚合液; (7)将步骤(6)中的聚合液离心并洗涤3-6次,获得表面蛋白印迹聚合物。
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