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江苏海洋大学陈金日获国家专利权

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龙图腾网获悉江苏海洋大学申请的专利一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119715481B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411865926.7,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法是由陈金日;单蕾;徐冬;李福后;胡曙鋆;王淑军;黄强;吴少杰;王伟霞;夏振强设计研发完成,并于2024-12-18向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法,其含荧光与比色两种检测模式,属于分析化学技术领域,本发明将双发夹结构的二价适配体与其互补序列互补,在硼氢化钠与硝酸银的作用下,于不同时间与不同温度下分别形成DNA银纳米簇与DNA吸附的银纳米颗粒。两种检测模式下,二价适配体皆为分子识别物,其互补序列皆为信号增强探针,通过检测荧光、吸光度及智能手机APP分析比色图像的R+B值,实现快速、超灵敏检测,该检测方法操作简便、高效、灵敏,且在加标实际样品检测中回收率和抗干扰能力较好,在氨基糖苷类抗生素类化合物的定性定量分析中具有良好的应用前景。

本发明授权一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法在权利要求书中公布了:1.一种基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法,其特征在于:所述基于二价核酸适配体的双模式物质智能检测方法包括荧光检测模式和比色检测模式,荧光模式下,二价适配体BivalentApt与互补DNAcDNA碱基互补,使BivalentApt序列的胞嘧啶位置更加分散,导致合成的DNA银纳米簇DNA-AgNCs荧光较弱,加入卡那霉素后BivalentApt构象变化,从而使得合成的DNA-AgNCs荧光显著增强;比色模式下,BivalentApt与cDNA形成的互补链打开了BivalentApt的双发夹结构,使得BivalentApt更容易吸附于合成的银纳米颗粒AgNPs表面,从而阻止了AgNPs聚集,加入卡那霉素后BivalentApt从AgNPs表面脱落,从而使得合成的AgNPs发生聚集,反应体系颜色由黄色变为灰色,吸光度发生显著改变,通过检测荧光、吸光度及智能手机APP分析比色图像的R+B值,实现快速、超灵敏检测; 所述BivalentApt序列如SEQIDNO.1所示:GGGACTTGGTTTAGGTAATGAGTCCCGGGACTTGGTTTAGGTAATGAGTCCC;所述cDNA序列如SEQIDNO.2所示:TAAACCAAGTCCG; 所述荧光检测模式最低检测限为5.98fmolL,所述荧光检测模式包括如下步骤: (1)DNA母液的准备:将含有DNA粉末的离心管配平置于离心机中离心,以8000rpmmin转速离心为30s,待离心结束后添加双蒸水并震荡混匀,使得DNA粉末充分溶解,准确定量DNA样品溶液至100μmolL,于4℃条件下保存备用; (2)BivalentApt序列与cDNA序列的互补:分别取10μL的BivalentApt与cDNA,溶于85μL缓冲液中反应,以形成dsDNA结构,所述缓冲液pH值为8.0; (3)BivalentApt与卡那霉素的识别:向步骤(2)复合物中加入10μL不同浓度的卡那霉素溶液,于37℃条件下反应60min,所述卡那霉素浓度为500fmolL~50nmolL; (4)DNA-AgNCs信号探针的制备:向步骤(3)溶液中加入2μLAgNO3溶液,激烈振荡5min后冰浴90min,之后向溶液中加入2μLNaBH4溶液避光冰浴240min,即可制得DNA-AgNCs信号探针,完成基于DNA-AgNCs的荧光检测模式的操作; 所述比色检测模式包括如下步骤: (1)DNA母液的准备:将含有DNA粉末的离心管配平置于离心机中离心,以8000rpmmin转速离心30s,待离心结束后添加双蒸水并震荡混匀,使得DNA粉末充分溶解,准确定量DNA样品溶液至100μmolL,于4℃条件下保存备用; (2)BivalentApt序列与cDNA序列的互补:分别取20μL的BivalentApt与cDNA,溶于40μL缓冲液中反应,以形成dsDNA结构,所述缓冲液的pH值为8.5; (3)BivalentApt与卡那霉素的识别:向步骤(2)复合物中加入不同浓度的卡那霉素溶液,于25℃条件下反应120min,所述卡那霉素浓度为0μmolL~500μmolL; (4)适配体模板化银纳米颗粒Apt-templatedAgNPs信号探针的制备:向步骤(3)溶液中加入60μLAgNO3溶液震荡混匀,冰浴后再加入60μLNaBH4溶液,混合震匀后避光反应5min; (5)智能手机分析图像R+B值:通过智能手机App测量不同浓度卡那霉素溶液下所合成适配体模板化银纳米颗粒Apt-templatedAgNPs图像的R+B值,从而得到卡那霉素浓度与R+B值的相关性,完成基于适配体模板化银纳米颗粒Apt-templatedAgNPs的卡那霉素比色智能适配体传感器的构建。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江苏海洋大学,其通讯地址为:222005 江苏省连云港市海州区江苏海洋大学;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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