隆平生物技术(海南)有限公司李晨光获国家专利权
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龙图腾网获悉隆平生物技术(海南)有限公司申请的专利一种创制玉米矮化材料的方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120536494B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511048243.7,技术领域涉及:C12N15/82;该发明授权一种创制玉米矮化材料的方法及其应用是由李晨光;贾慧琳;赵军;刘乐;孙宇;梁伊设计研发完成,并于2025-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种创制玉米矮化材料的方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种创制玉米矮化材料的方法及其应用。本发明公开的一种创制玉米矮化材料的方法,具体利用基因工程手段对玉米中目标基因ZmGA20ox3和或ZmGA20ox5进行特定关键位点编辑,所述经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox3和或ZmGA20ox5所编码的蛋白质发生特定氨基酸位点突变,并进一步培育和筛选得到玉米矮化材料。本发明提供的方法可用于培育不同株高和其他农艺性状的转基因玉米植株,同时为创制矮杆玉米、降低玉米穗位高度、减小玉米植株叶片夹角和增加玉米产量提供了新的育种技术方案;在农业中能够更密集地种植作物,从而提高作物单位面积的产量,具有重要的育种意义。
本发明授权一种创制玉米矮化材料的方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种创制玉米矮化材料的方法,其特征在于,利用CRISPRCasD基因编辑技术对玉米中目标基因ZmGA20ox3和ZmGA20ox5进行特定关键位点编辑,所述特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox3和ZmGA20ox5所编码的蛋白质发生特定氨基酸位点突变,并进一步培育和筛选得到玉米矮化材料;目标基因ZmGA20ox3的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示,其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示;目标基因ZmGA20ox5的核苷酸序列如SEQ ID NO: 15所示,其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示; 所述特定关键位点和氨基酸位点突变涉及以下任一种情况: 1经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox3第131‑542位碱基缺失,所编码蛋白质的氨基酸序列自第18位氨基酸发生改变;经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox5第684位碱基插入碱基G,所编码蛋白质的氨基酸序列自第225位氨基酸发生改变; 2经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox3第2440位插入碱基GA,所编码蛋白质的氨基酸序列自第344位氨基酸发生改变;经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox5第2348位缺失碱基C,所编码蛋白质的氨基酸序列自第419位氨基酸发生改变; 所述方法具体步骤如下: 1对玉米中的目标基因ZmGA20ox3和ZmGA20ox5设计靶标位点,并将根据靶标位点设计的gRNA序列串联到相应的携带CasD蛋白编码基因的基因编辑载体上,得到串联基因编辑载体;针对玉米中的目标基因ZmGA20ox3,gRNA序列为: LP216‑OX3‑gRNA:cccaactcccagcattgacctcc; LP217‑OX3‑ gRNA:cgccgcggcagtacccggacttc; 针对玉米中的目标基因ZmGA20ox5,gRNA序列为: LP216‑OX5‑gRNA:cgaccggttcgcggccaagctcc; LP217‑OX5‑gRNA:cgccgcggcgctacccggacttc; 2将步骤1中所述的串联基因编辑载体通过克隆反应连入植物表达载体,得到重组表达载体; 3将步骤2所述的重组表达载体转入农杆菌,进行玉米遗传转化,在玉米中实现对目标基因ZmGA20ox3和ZmGA20ox5的特定关键位点编辑以及经特定关键位点编辑后的目标基因ZmGA20ox3和ZmGA20ox5所编码蛋白质的特定氨基酸位点突变,经培育和筛选得到玉米矮化材料。
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