江苏大学由天艳获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏大学申请的专利基于近距离杂交技术的光电化学-可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115032403B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210651090.5,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权基于近距离杂交技术的光电化学-可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法是由由天艳;孟淑云;刘东;刘书达设计研发完成,并于2022-06-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于近距离杂交技术的光电化学-可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物传感器技术领域,公开了基于近距离杂交技术的光电化学‑可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法。通过近距离杂交技术的调控,引入具有局域等离子体共振效应和催化性能的金纳米粒子AuNPs作为信号探针,从而实现基于单个敏感元件的PEC‑可视化双模式检测。在Cry1Ab和抗体标记的单链DNAAb2‑S2的协助下,两个探针Ab1‑S1‑AuNPs和Ab2‑S2发生近距离杂交,使Ab1‑S1‑AuNPs从电极界面释放,PEC增强效果减弱,使光电流信号显著降低。同时,释放的Ab1‑S1‑AuNPs催化显色底物显色。引入便携式色差仪,将溶液颜色传送至手机软件,将捕捉到的颜色转化为RGB数字信号,实现Cry1Ab的精准可视化分析。该PEC‑可视化双模式传感策略既可用于现场监测的初步筛选,也可扩展到PEC的高灵敏分析。
本发明授权基于近距离杂交技术的光电化学-可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法在权利要求书中公布了:1.基于近距离杂交技术的光电化学‑可视化双模式传感器检测Cry1Ab蛋白的方法,其特征在于,步骤如下: 1制备硒化镉量子点CdSe QDs纳米材料,备用; 2制备金纳米粒子AuNPs,备用; 3分别制备Ab1‑S1‑AuNPs和Ab2‑S2复合材料,备用; 4氧化铟锡玻璃ITO电极经预处理后,备用; 5将步骤1制备的CdSe QDs纳米材料修饰到步骤4预处理的氧化铟锡玻璃ITO电极表面,并在室温下干燥,此时,产品标记为CdSe QDsITO; 6将单链DNA S0修饰在步骤5所得电极表面,并在一定温度下孵育一段时间,之后用PBS对产品进行清洗,此时,产品标记为S0CdSe QDsITO; 7将6‑巯基‑1‑己醇MCH修饰在步骤6所获得的传感器表面,以封闭未结合的非特异性位点,之后用PBS对产品进行清洗,此时,产品标记为MCHS0CdSe QDsITO; 8将步骤3制备的Ab1‑S1‑AuNPs材料修饰到步骤7所制得的传感器表面,并在一定温度下孵育一段时间,之后用PBS对产品进行清洗,此时,产品标记为Ab1‑S1‑AuNPsMCHS0CdSe QDsITO; 9将步骤3制备的Ab2‑S2和不同浓度的Cry1Ab蛋白滴加在步骤8所制得的电极表面,孵育一段时间,此时,产品标记为Cry1Ab+Ab2‑S2Ab1‑S1‑AuNPsMCHS0CdSe QDsITO; 10将步骤9制备的传感器用NaAc‑HAc缓冲溶液连续清洗两根ITO电极表面,清洗过的传感器进行光电化学测试;清洗后收集的混合溶液中依次加入H2O2和TMB反应后,将溶液放入定制的石英管中,用色差仪进行颜色测量RGB; 其中,抗体Ab1和Ab2用于特异性识别Cry1Ab蛋白; S0:5′‑CGC GTT AAC ATA CAA TAG ATC GCG‑CH26‑SH‑3′S1:5′‑HS‑GCG GAT CTA TTG TAT CAC ATA TTT TTT TTT TTT TTT TTT CAC CGT ATG CTA CTG TAG AT‑NH2‑3′S2:5′‑NH2‑TAG GAA AAG GAG GAG GGT GGT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTA GATACA ATA GAT C‑3′。
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