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龙图腾网获悉江南大学申请的专利多途径优化提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的方法及菌株获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115927143B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211079022.2，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权多途径优化提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的方法及菌株是由刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;武耀康;李洋设计研发完成，并于2022-09-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本多途径优化提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的方法及菌株在说明书摘要公布了：本发明公开了一种多途径优化提高N‑乙酰氨基葡萄糖产量的方法及菌株，本发明以枯草芽孢杆菌168菌株为基础，使用基于CRISPRCpf1的基因组编辑系统从头构建了N‑乙酰氨基葡萄糖的合成菌株，并利用基于稳定期启动子与dCpf1的时期型CRISPRi系统对竞争途径进行了高通量组合优化，从而得到了更加高效且稳定的N‑乙酰氨基葡萄糖合成菌株。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌的基因敲除与启动子替换都是使用基于CRISPRCpf1的基因组无痕编辑系统完成的，且最终菌株中未使用任何质粒，故可持续、稳定、高效地利用葡萄糖合成乙酰氨基葡萄糖，其在摇瓶上产量可达到33.7gL，为其工业化奠定了基础。

本发明授权多途径优化提高N-乙酰氨基葡萄糖产量的方法及菌株在权利要求书中公布了：1.一种N‑乙酰氨基葡萄糖产量提高的菌株，其特征在于，所述的菌株以枯草芽孢杆菌为宿主，采用CRISPRCpf1基因组编辑系统敲除氨基葡萄糖转运蛋白编码基因nagP、6‑磷酸乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶编码基因nagA、6‑磷酸氨基葡萄糖脱氨酶编码基因nagB、6‑磷酸氨基葡萄糖脱氨酶编码基因gamA、乳酸脱氢酶编码基因ldh和乙酸激酶编码基因ackA，并使用葡萄糖诱导启动子PlysC表达氨基葡萄糖合成酶编码基因glmS，并采用时期型CRISPRi系统对N‑乙酰氨基葡萄糖合成的竞争途径关键基因zwf、pfkA和glmM从稳定期进行自发弱化调控，避免所述竞争途径的弱化对细胞生长产生影响，并在基因组中整合表达了两个GNA1基因和磷酸酶编码基因yqaB； 其中，所述的时期型CRISPRi系统包括dCpf1蛋白和crRNA，所述的crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，dCpf1蛋白使用组成型启动子PgroES表达，crRNA使用稳定期启动子PsrfA表达； 所述的宿主是以B.subtilis 168为出发菌株，使用CRISPRCpf1技术在基因组上整合了木糖诱导型启动子PxylA控制的转录因子comK‑comS基因，并将trpC基因回复突变为核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的野生型的基因trpC0得到； 所述的GNA1基因分别在aprE位点和alsSD位点进行整合表达； 所述的crRNA在amyE位点整合表达； 所述的dCpf1蛋白在lacA位点整合表达。

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