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龙图腾网获悉杭州联川生物技术股份有限公司申请的专利一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体的制备方法及其专用试剂获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115612656B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211145580.4，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体的制备方法及其专用试剂是由杨欢欢;梁健;宋金宇;李璐璐设计研发完成，并于2022-09-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体的制备方法及其专用试剂在说明书摘要公布了：本发明公开了一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体的制备方法，包括制备过程和纯化过程。本发明提供的一种红豆杉茎、叶原生质体制备方法，简单易操作，原材料易获得，价格低廉，试剂组分具有良好生物相容性，无有害成分，安全环保。本发明提供了一种简单快速的红豆杉茎、叶原生质体酶解制备方法，采用真空抽滤，加速酶解液的渗透，提高酶解效率，从而能快速获得原生质体。同时结合碘克沙醇溶液密度梯度沉降进行原生质体的高纯度分离，获得大小均一，形态完整的原生质体，为后续转化、单细胞转录组测序等科学研究提供方便。

本发明授权一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体的制备方法及其专用试剂在权利要求书中公布了：1.一种新鲜红豆杉茎、叶原生质体在单细胞转录组测序中的应用，其特征在于，所述新鲜红豆杉茎、叶原生质体的获得方法包括制备过程和纯化过程，具体步骤如下： 一、制备过程： S1，取0.5-1g新鲜红豆杉组织，清洗后吸干水分； S2，后将新鲜红豆杉组织置于培养皿中，加入酶解液，在冰上用刀片将新鲜红豆杉组织切成约0.1-0.5mm的细丝； S3，真空抽滤30min，后于28℃避光震荡酶解4小时，振荡频率为40rpm，得到酶解后的组织； 所述酶解液中包括0.40-0.50重量份的纤维素酶、0.20-0.30重量份的半纤维素酶、0.10-0.15重量份的离析酶、2.5-3.0重量份的甘露醇、0.65-0.70重量份的的氯化钾、1.90-1.95重量份的MES、0.4-0.6重量份的氯化钙、0.5-3.5重量份的BSA和0.014-0.020重量份的β-巯基乙醇； 二、纯化过程： S4，使用200目过滤筛过滤酶解后的组织，后于4℃下离心并弃上清，得到沉淀； S5，向步骤S4所得到的沉淀中加入清洗液，进行重悬，得到原生体质重悬液； S6，另取离心管，加入重悬液相同体积的纯化试剂，将原生体质重悬液倾斜加入到纯化试剂中，得到混合物； S7，将混合物在4℃下离心，取中间的原生质体层，加入清洗液； S8，在4℃下离心，后弃上清，并加入甘露醇溶液重悬沉淀，即可得到新鲜红豆杉组织的原生质体； 所述清洗液中包括0.3-0.5M的氯化钠、5-15mM的氯化钙、15-25mM的氯化钾和5-15mM的MES； 所述纯化试剂包括碘克沙醇溶液。

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