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龙图腾网获悉浙江农林大学;宁波海关技术中心申请的专利能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115927753B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211251397.2，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒是由宋厚辉;周莹珊;赵秀玲;倪健波;王晓杜;董婉玉;于浩然;杨杨;姜胜;邵春艳;杨永春;陈绵绵;程昌勇;王建峰设计研发完成，并于2022-10-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒在说明书摘要公布了：本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒。该试剂盒包括：预扩增引物混合液，所含预扩增引物的序列如SEQIDNO：1～14所示；探针混合液，包括左侧探针和右侧探针，序列如SEQIDNO：15～28所示；MLPA缓冲液；连接缓冲液A；连接缓冲液B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，其包括如序列SEQIDNO：29和30所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照。本发明具备高通量、特异性好、灵敏度高的特点；操作更简便，检测时间更短。

本发明授权能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种能检测多种猪呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包括： 1预扩增引物混合液； 该混合液中包括预扩增引物，其序列如SEQIDNO：1～14所示； 2探针混合液； 该混合液中包括左侧探针和右侧探针，其序列如SEQIDNO：15～28所示； 3MLPA缓冲液； 4连接缓冲液A； 5连接缓冲液B； 6连接酶Ligase-65； 7PCR反应混合液，其包括如序列SEQIDNO：29和30所示的通用引物； 8SALSA聚合酶； 9阴性对照； 10阳性对照； 在所述预扩增引物混合液的预扩增引物中：序列SEQIDNO：1和序列SEQIDNO：2分别是猪繁殖与呼吸综合征病毒预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：3和序列SEQIDNO：4分别是猪胸膜肺炎放线杆菌预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：5和序列SEQIDNO：6分别是猪多杀性巴氏杆菌预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：7和SEQIDNO：8分别是猪呼吸道冠状病毒预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：9和SEQIDNO：10分别是猪流感病毒预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：11和SEQIDNO：12分别是副猪嗜血杆菌预扩增的正向和反向引物；序列SEQIDNO：13和SEQIDNO：14分别是猪圆环病毒2型预扩增的正向和反向引物； 在所述探针混合液的探针中：序列SEQIDNO：15和SEQIDNO：16分别为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：17和SEQIDNO：18分别为检测猪胸膜肺炎放线杆菌的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：19和SEQIDNO：20分别为检测猪多杀性巴氏杆菌的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：21和SEQIDNO：22分别为检测猪呼吸道冠状病毒的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：23和SEQIDNO：24分别为检测猪流感病毒的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：25和SEQIDNO：26分别为检测副猪嗜血杆菌的左侧探针和右侧探针；序列SEQIDNO：27和SEQIDNO：28分别为检测猪圆环病毒2型的左侧探针和右侧探针； 在所述PCR反应混合液的引物中，序列SEQIDNO：29和SEQIDNO：30分别是通用正向和反向引物； 其中，序列SEQIDNO：16、SEQIDNO：18、SEQIDNO：20、SEQIDNO：22、SEQIDNO：24、SEQIDNO：26和SEQIDNO：28的5’端进行磷酸化处理； 所述阳性对照是基因体外转录RNA与阳性重组质粒DNA的混合物；其中基因体外转录RNA是猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因、猪呼吸道冠状病毒的S基因、猪流感病毒的M基因的体外转录RNA，阳性重组质粒DNA是指猪胸膜肺炎放线杆菌的ApxIVA基因、猪多杀性巴氏杆菌的toxA基因、副猪嗜血杆菌的16srRNA基因、猪圆环病毒2型的ORF2基因的阳性重组质粒DNA。

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