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龙图腾网获悉梧州市中医医院;广西中医药大学申请的专利一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法及其成分含量测定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116953105B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310861001.4，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法及其成分含量测定方法是由罗威;梁平;黄秋燕;李耀华;伍颖光;谢洁兰;潘小姣;梁宝琳;易昭夏;梁建丽;潘真真;李芳婵;邓燕玲;刘思彤;黄春慧设计研发完成，并于2023-07-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法及其成分含量测定方法在说明书摘要公布了：本发明公开一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法及其成分含量测定方法，属于中药制剂检测分析技术领域。本发明的蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：1供试品溶液的制备；2混合对照品溶液的制备；3指纹图谱的建立。本发明的蛇药酒中多成分含量的测定方法，包括以下步骤：1供试品溶液的制备；2混合对照品溶液的制备；3相对校正因子的计算；4待测成分含量的测定。本发明建立蛇药酒HPLC指纹图谱并结合一测多评法测定蛇药酒中异荭草苷、荭草苷和木犀草素的含量，可对蛇药酒整体成分的信息特征进行较为全面的反映，检测操作快捷、成本低廉、效率高，可为蛇药酒的整体质量评价和标准完善提供科学合理的依据。

本发明授权一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法及其成分含量测定方法在权利要求书中公布了：1.一种蛇药酒HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤： 1供试品溶液的制备：将蛇药酒样品进行离心，取上清液，得到供试品溶液； 所述蛇药酒的制备为：取小叶三点金65g、红背丝绸21.6g、石柑子21.6g、通城虎21.6g、东风菜21.6g、小叶半边莲21.6g，将以上六味药混合均匀，置入容器内，加入白酒1300g，搅匀；密闭浸泡30-40天，15天搅拌一次，滤过，分装，每瓶装100mL； 2混合对照品溶液的制备：分别取原儿茶酸、岩白菜素、异荭草苷、荭草苷、木犀草素对照品适量，精密称定，分别置于25、10、10、25、50mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，分别得到质量浓度分别为0.3829、1.4320、0.9428、0.4184、0.1896mg·mL-1的对照品储备液；分别精密吸取上述对照品储备液适量，置于10mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，即得混合对照品溶液； 3HPLC指纹图谱的建立：取步骤1制备的供试品溶液和步骤2制备的混合对照品溶液，采用高效液相色谱法进行分析，以10批次供试品溶液色谱图为基础，以蛇药酒样品编号S1为参照色谱图，采用中位数法对各指纹图谱的色谱峰进行多点校正和Mark峰匹配，时间窗宽度为0.5，从而建立叠加色谱图，再利用混合对照品溶液色谱图指认5个共有色谱峰； 步骤3中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为SHIMADZUshim-packVP-ODS，4.6mm×250mm，5μm型号色谱柱；流动相为乙腈-0.05%甲酸，进行梯度洗脱，其中，乙腈为流动相A，0.05%甲酸为流动相B；检测波长采用转换波长方法；流速为0.8～1.0mLmin；柱温为20～22℃；进样量为10～12μL； 所述梯度洗脱程序为：0～12min，8%A；12～14min，8～15%A；14～35min，15%A；35～50min，15～18%A；50～70min，18～40%A；70～75min，40%A；所述转换波长方法具体为：0～17min，260～275nm；17～25min，275～350nm；25～75min，350nm。

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