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龙图腾网获悉郑州伊美诺生物技术有限公司申请的专利一种重组鲎试剂及其制备方法、应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118581071B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410723236.1，技术领域涉及：C12N9/64；该发明授权一种重组鲎试剂及其制备方法、应用是由李桂林;徐延伟;陈超;赵巧辉;王晓姣;付光宇;吴学炜;杨增利设计研发完成，并于2024-06-05向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种重组鲎试剂及其制备方法、应用在说明书摘要公布了：本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种重组鲎试剂及其制备方法、应用。本发明通过利用昆虫杆状病毒表达系统和蛋白稳定剂的获得了高活性的重组鲎三因子凝固酶原、B和C因子，用于检测细菌内毒素。该方法可以排除G因子旁路干扰，从而有效地避免了葡聚糖产生假阳性的可能性，同时解决天然鲎试剂资源匮乏问题；重组鲎试剂可采用终点比色法，简化检测模式，在常规酶标仪完成检测；利用级联反应，减少样本使用量、提升检测灵敏度；优化后检测时间缩短至20min，大大提升检测效率；可作为一种新型、快速的内毒素检测试剂。

本发明授权一种重组鲎试剂及其制备方法、应用在权利要求书中公布了：1.一种重组鲎试剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1：将编码鲎C因子、B因子、凝固酶原的基因片段分别与杆状病毒表达载体连接、转化，经提取分别获得重组质粒1~3； 步骤2：将所述重组质粒1~3分别感染昆虫细胞，培养，收集培养上清液，分别获得重组鲎C因子、重组鲎B因子和重组鲎凝固酶原因子； 步骤3：将重组鲎C因子、重组鲎B因子和重组鲎凝固酶原因子与无热源Tris缓冲液、鲎三肽底物、无内毒素水混合，得到重组鲎试剂； 步骤2中在所述感染之后还包括添加蛋白稳定剂的步骤； 所述蛋白稳定剂由蛋白酶类抑制剂和氨基酸类稳定剂组成；所述蛋白酶类抑制剂为苯甲磺酰氟，所述氨基酸类稳定剂为精氨酸； 所述氨基酸类稳定剂在所述感染之后的0~24h添加； 所述蛋白酶类抑制剂在所述感染之后的24~48h添加； 所述蛋白酶类抑制剂的质量体积百分比终浓度0.0625%~0.125%，所述氨基酸类稳定剂的终浓度为0.5gL-5gL； 所述鲎C因子的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示； 所述鲎B因子的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示； 所述凝固酶原的氨基酸序列如SEQIDNO：5所示。

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