江西浩然生物制药有限公司徐富勇获国家专利权
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龙图腾网获悉江西浩然生物制药有限公司申请的专利玻璃酸酶及其制备工艺获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120442600B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510962740.1,技术领域涉及:C12N9/26;该发明授权玻璃酸酶及其制备工艺是由徐富勇;魏超娟;熊磊;周颖颖;耿卫锋;胡著阳设计研发完成,并于2025-07-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本玻璃酸酶及其制备工艺在说明书摘要公布了:本申请属于生物技术领域,涉及一种玻璃酸酶及其制备工艺。所述玻璃酸酶的制备工艺,包括以下步骤:1新鲜牛睾丸经匀浆后提取,得到中间体I;2中间体I经疏水层析柱层析纯化,得到中间体II;3中间体II经阳离子交换层析柱层析纯化,得到中间体III;4中间体III经冻干,得到玻璃酸酶成品。本方法具有操作简便、生产成本低,产品收率高,玻璃酸酶纯度更高的优点。
本发明授权玻璃酸酶及其制备工艺在权利要求书中公布了:1.一种玻璃酸酶的制备工艺,其特征在于,包括以下步骤: 1将新鲜牛睾丸洗净剥除外膜,切碎后用匀浆机匀浆,将匀浆物转移至缓冲液1中,搅拌提取2h,离心收集上清液;离心沉淀物加缓冲液2,搅拌提取2h,离心收集上清液;合并2次上清液,即为中间体I;缓冲液1和缓冲液2均为含50mM氯化钠的50mM乙酸钠溶液,pH为5.0-5.5; 2往中间体I中添加固体硫酸铵,搅拌溶解,调节pH及电导率与平衡液一致,上样至已平衡好的疏水层析柱;上样结束后用平衡液洗涤未吸附的蛋白,并检测流出液在280nm处的吸光值,直至吸光值不再下降;再用洗脱液进行洗脱,并检测洗脱液在280nm处的吸光值,收集洗脱峰,即为中间体II;疏水层析柱的填料为以丁基、辛基、苯基或新戊基为配基的乙烯醇和甲基丙烯酸酯共聚物、琼脂糖、纤维素、聚苯乙烯、聚丙烯酸甲酯或壳聚糖; 3中间体II用截留分子量为10kD的超滤膜超滤后进行超滤换盐,使超滤液的pH及电导率与平衡液一致,溶解后上样至阳离子交换层析柱,层析柱预先用平衡液平衡好;上样结束后用平衡液洗涤未吸附的蛋白,并检测洗涤液在280nm处的吸光值,直至吸光值不再下降;再用洗脱液洗脱,并检测洗脱液在280nm处的吸光值,直至吸光值不再下降,收集洗脱峰,即为中间体III;阳离子交换层析柱填料配基为羧甲基、磺酸基、磷酸基、亚磷酸基、酚基;洗脱液为0.1MNaAc和0.1MNaCl溶液,pH为4.5-5.0; 4中间体III经冻干,得到玻璃酸酶成品。
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