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龙图腾网获悉北京医院申请的专利从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119220485B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411619780.8，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法是由吴志远;印华润;赵宁;赵文心;尹洪超;李拥军设计研发完成，并于2024-11-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法，涉及人体细胞培养技术领域。该从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法，获取胶原酶A溶液；向处理后的人腹主动脉瘤壁组织标本中加入胶原酶A溶液后剪碎；将剪碎后的人腹主动脉瘤壁组织标本转移至37度细胞培养箱中进行培养；终止消化后离心获得细胞悬液；弃上清液，重悬细胞沉淀，离心重复三次；再次重悬细胞沉淀，吹打均匀化后转移至T25培养瓶中，放置到37度细胞培养箱中培养中静置培养；出现波峰波谷状态时，用0.25％胰酶消化传代，转移至新的T25培养瓶中；正常培养传代至P3代冻存于液氮中，可以防止细胞受损，保持细胞的活性和增殖能力。

本发明授权从人腹主动脉壁中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法在权利要求书中公布了：1.从人腹主动脉壁标本中分离、培养原代血管平滑肌细胞的方法，包括以下步骤： 获取胶原酶A溶液； 向处理后的人腹主动脉瘤壁组织标本中加入胶原酶A溶液后剪碎； 人腹主动脉瘤壁组织标本的处理过程包括以下步骤： 取离体0.5h-1h内的人腹主动脉瘤壁组织，装入PBS+三抗的混合液中移至超净台； 用PBS+三抗的混合液反复冲洗，将人腹主动脉瘤壁组织上的血凝块洗净获得人腹主动脉瘤壁组织标本； 处理后的人腹主动脉瘤壁组织标本至于35mm2培养皿中； 人腹主动脉瘤壁组织标本中加入胶原酶A溶液剪碎后的人腹主动脉瘤壁组织标本体积为1mm3 将剪碎后的人腹主动脉瘤壁组织标本转移至37度细胞培养箱中进行培养； 将35mm2培养皿转移至37度细胞培养箱中； 每隔30-60分钟观察一次，并用吸管反复吹打； 重复4-6h； 在培养4-6h后，摇荡见酶液浑浊，加入含预热10%FBSSMCM培养基终止消化； 终止消化后离心获得细胞悬液； 判断是否终止消化的过程如下： 实时获取消化过程中的物理特征，包括细胞密度、细胞形态特征、聚集指数以及细胞活力指标； 获取数据库中存储的达到消化完成状态时的参定细胞密度、参定细胞形态特征、参定聚集指数以及参定细胞活力指标； 将获取的细胞密度、细胞形态特征、聚集指数以及细胞活力指标与参定细胞密度、参定细胞形态特征、参定聚集指数以及参定细胞活力指标进行比对分析，获取比对指数，比对指数用于表示当前状态的消化情况与参定完成消化时的状态的相似度； 比对指数的获取方法如下： 式中，为比对系数，为细胞密度，为细胞形态特征，为聚集指数，为细胞活力指标，为参定细胞密度，为参定细胞形态特征，为参定聚集指数，为参定细胞活力指标，为密度权重因子，为形态权重因子，为聚集指数权重因子，为活力指标权重因子，为与的相似度函数； 若比对指数小于或等于数据库中存储的比对阈值，则当前的状态以完成消化，终止消化； 弃上清液，重悬细胞沉淀，离心重复三次； 再次重悬细胞沉淀，吹打均匀化后转移至T25培养瓶中，放置到37度细胞培养箱中培养中静置培养； 出现波峰波谷状态时，用0.25%胰酶消化传代，转移至新的T25培养瓶中； 正常培养传代至P3代冻存于液氮中。

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