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龙图腾网获悉浙江大学医学院附属第一医院申请的专利一种CAR-T细胞生产方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116121195B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210996804.6，技术领域涉及：C12N5/10；该发明授权一种CAR-T细胞生产方法及其应用是由梁廷波;汤江辉;盛剑鹏设计研发完成，并于2022-08-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种CAR-T细胞生产方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种CAR‑T细胞生产方法及其应用，属于肿瘤免疫治疗技术领域。本发明首先制备过表达Runx3的CAR‑T细胞，然后在1μMAKTi12环境下扩增过表达Runx3的CAR‑T细胞，从而生产出一种新型CAR‑T细胞。其中Runx3过表达能增强CAR‑T细胞效应功能，并促进CAR‑T细胞肿瘤浸润，但不影响AKT抑制剂依赖的T细胞干性的维持，AKT抑制剂的使用则能挽救CAR‑T细胞在体内不能持续存活和扩增不足的问题，二者协同、互补，因此生产的新型CAR‑T细胞具有更好长期存活、效应和实体肿瘤浸润能力，进而具有更强克服实体瘤困境的综合能力。

本发明授权一种CAR-T细胞生产方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种CAR-T细胞生产方法，其特征在于，主要包括以下两个步骤： 步骤一：制备过表达Runx3的CAR-T细胞； 步骤二：在0.5~1.5μMAKTi12环境下扩增过表达Runx3的CAR-T细胞； 所述CAR-T细胞包括人源CAR-T细胞和小鼠来源CAR-T细胞，所述步骤一包括制备过表达Runx3的CAR病毒表达载体的过程； 人源CAR-T细胞制备过表达Runx3的CAR病毒表达载体时，CAR采用三代CAR的组成方式，由人CD8信号肽，scFv片段，人CD8胞外区、CD28跨膜区和胞内段、4-1BB胞内段、CD3ζ胞内段组成，核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；病毒表达载体骨架为pLVX-EF1a-IRES-mCherry； 小鼠来源CAR-T细胞制备过表达Runx3的CAR病毒表达载体时，CAR采用二代CAR的组成方式，由鼠CD8信号肽，scFv片段，鼠CD8胞外区和跨膜区、CD28胞内段、CD3ζ胞内段组成，N端加入了StreptagII方便检测，核苷酸序列如SEQIDNO.9所示，氨基酸序列如SEQIDNO.10所示；病毒表达载体骨架为pMSCV-IRES-GFPIIpMIGII； 人Runx3与CAR和鼠Runx3与CAR都通过P2A序列连接。

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