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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体、试剂盒及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120442717B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-21发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510962517.7，技术领域涉及：C12N15/867；该发明授权一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体、试剂盒及应用是由马光旭;陈艳琼;杨怡;陈学秋设计研发完成，并于2025-07-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体、试剂盒及应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体、试剂盒及应用，属于动物寄生虫病防治领域。本申请中的慢病毒载体通过整合特定编码序列至被侵染线虫的基因组，在线虫体内稳定、持续表达短发夹RNAshRNA，高效产生初级单链小RNAsiRNA，这些siRNA靶向同源的目的基因mRNA造成其降解，实现稳定、持续基因沉默效应。本发明突破传统动物寄生线虫RNA干扰RNAi技术效率低、不稳定的瓶颈，显著提高常规RNAi的时效性，可用于建立动物寄生线虫长效RNAi技术体系，在线虫感染、寄生、致病等宿主体内过程的研究以及动物寄生线虫病防控等方面具有应用价值。

本发明授权一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体、试剂盒及应用在权利要求书中公布了：1.一种用于动物寄生线虫长效基因敲降的载体，其特征在于，首先以秀丽隐杆线虫的基因组DNA为模板通过PCR扩增获得Ce-peft-3启动子序列，在启动子上游引物和Ce-tbb-2的3’UTR下游引物的5’端分别引入酶切位点，以Ce-peft-3、Ce-tbb-2的3’UTR和TurboGFP的CDS序列设计并合成特异性引物，用于无缝克隆技术；以pGIPZ质粒为模版，通过无缝克隆插入秀丽隐杆线虫强启动子Ce-peft-3、TurboGFP和Ce-tbb-2的基因表达调控元件3’UTR，构建慢病毒重组质粒，包装浓缩为慢病毒悬液，侵染动物寄生线虫感染阶段L3幼虫，验证慢病毒介导的外源DNA整合；设计目标基因shRNA，选择AgeI和EcoRI设计正向引物序列SEQIDNO.9和反向引物序列SEQIDNO.10，通过双酶切法将shRNA插入pLKO.1载体中，构建干扰载体，用于目标基因shRNA的稳定表达，长时间靶向目标基因，实现稳定、长期干扰效果，验证RNA干扰的稳定性。

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